Журнал мнемон: Мнемон. Исследования и публикации по истории античного мира (Журнал) — Отдел социального служения и благотворительности при Астраханско-Камызякской епархии

Содержание

Мнемон. Альманах, №13. Исследования и публикации по истории античного мира | ISBN 9785752507380

Тринадцатый выпуск альманаха «Мнемон» содержит большую подборку статей и материалов по истории античного мира. Исследовательские работы, как и прежде, группируются по четырем разделам: античная Греция, эллинизм, Рим и античная культура. Ряд статей отличаются несомненным новаторским характером. Это работы об афинской морской державе, политической борьбе в Афинах времени Пелопоннесской войны, об особенностях римской демократии. В разделе об античной культуре особый интерес представляют статьи об античном театре, об установлении императорского культа в Британии и раннем христианстве. Среди работ историографического характера безусловно новым является этюд о видном петербургском историке, профессоре Д.П.Каллистове. Альманах «Мнемон» предназначается для студентов и преподавателей гуманитарных факультетов, а также для всех, кто интересуется историей и культурой античного мира.

Издание осуществлено при поддержке Фонда научных исследований истории и культуры стран Европы…

Trinadtsatyj vypusk almanakha «Mnemon» soderzhit bolshuju podborku statej i materialov po istorii antichnogo mira. Issledovatelskie raboty, kak i prezhde, gruppirujutsja po chetyrem razdelam: antichnaja Gretsija, ellinizm, Rim i antichnaja kultura. Rjad statej otlichajutsja nesomnennym novatorskim kharakterom. Eto raboty ob afinskoj morskoj derzhave, politicheskoj borbe v Afinakh vremeni Peloponnesskoj vojny, ob osobennostjakh rimskoj demokratii. V razdele ob antichnoj kulture osobyj interes predstavljajut stati ob antichnom teatre, ob ustanovlenii imperatorskogo kulta v Britanii i rannem khristianstve. Sredi rabot istoriograficheskogo kharaktera bezuslovno novym javljaetsja etjud o vidnom peterburgskom istorike, professore D.P.Kallistove. Almanakh «Mnemon» prednaznachaetsja dlja studentov i prepodavatelej gumanitarnykh fakultetov, a takzhe dlja vsekh, kto interesuetsja istoriej i kulturoj antichnogo mira.

Izdanie osuschestvleno pri podderzhke Fonda nauchnykh issledovanij istorii i kultury stran Evropy…

Святослав Логинов «Свет в окошке»

Это классическая русская фантастика в том виде, какой её хотел бы видеть Голливуд. Это нечто серое, унылое, переполненное через край душевными самокопаниями и даже после прочтения на языке еще долго остается привкус пыли.

Но обо всём по порядку! Начнем, пожалуй с главного героя. Илья Ильич, бывший военный, бывший строитель, бывший пенсионер, а ныне обитатель загробного царства мертвых больше всего характеризуется добродушной тупостью. Попав в жизнь после смерти, Илья Ильич, недолго думая, начинает делать то, что делал всегда, а именно — тянуть лямку. Наблюдать за тем, как кто-то ведет столь небогатое по событиям существование довольно скучно. Нет, конечно встречаются проблески, но их скорее можно списать на интересную природу созданного автором мира, а единственное умное действие самого Ильи Ильича поражает скорее не своей гениальностью, а тем как до этого не додумались остальные обитатели загробного мира.

Кстати, об этом мире. Он, безусловно, любопытен, но автор как будто специально избегает всех самых интересных моментов. Гладиаторские бои бессмертных, тайная жизнь Цитадели,возможность каждого жителя по сути создавать всё что угодно, ограниченная только воображением — вот далеко неполный список нераскрытых тем. Вместо этого автор делает фокус на… да ни на чем если честно, фокус постоянно плавает. Вообще всё повествование можно разделить условно на четыре части: первая — вводная, вторая — история прорыва в Цитадель, третья — история заботы о незнакомой девочке и четвертая — скучная.

На протяжении всего произведения всплывает куча второстепенных персонажей. Появляются они быстро, уходят тоже практически в той же сцене и толком проникнуться какими-то чувствами к ним не успеваешь. Хотя сыщик Афоня явно должен вызывать в душе сладостную тягу к чему-то русскому, а девочка Анюта должна прошибать слезу. Но этого не происходит. Кроме того, все персонажи, включая и главного героя, подлецы, только кто-то в большей, а кто-то в меньшей степени.

Жена с высоко поднятой головой продается за деньги, сын, стиснув зубы (тяжко-о) кидает отца, а приятели и знакомые дружно делают вид, что не никогда тебя в глаза не видели. Друг к другу у этих подлецов образуется некоторое взаимопонимание, мол, да, козел вы, батенька, но и мы сами такие же, так что строго судить не будем. Из-за этого уже и вовсе никакими чувствами проникаться к персонажам попросту не хочется. И даже единственная встреча с выдающимся членом общества — Николаем Василиевичем Гоголем — тоже удивительным образом невыносимо скучна.

Ну и конечно про главную черту этого произведения — философию. Автор буквально и без всякого стеснения впихивает читателю в горло и последний от такого обращения задыхается и захлебывается. И вроде бы все мысли достаточно нормальные и понятные: вспоминайте умерших, думайте, как распоряжаться своими возможностями, помогайте ближним и т.д. и т.п. Но от того, что автор их доносит чуть ли не открытым текстом и повторяет по нескольку раз уже на середине книги начинает передергивать. А уж последние две главы, которые целиком состоят из нотаций и вовсе становятся невыносимыми.

Немного про язык. Он вроде бы правильный, даже красивый, но при этом изобилует старыми, неестественными и несвойственными для нормальной человеческой речи выражениями и причитаниями. Из-за этого периодически возникает ощущение, что читаешь какое-то классическое произведение из репертуара шестого класса русского языка и литературы. Плохо это или хорошо — решайте сами.

Несмотря на все недостатки, написана книга хорошо, а созданный автором мир после смерти, где память людей превратилась в универсальную и единственную валюту — интересен. Буду ли я рекомендовать её друзьям? Пожалуй, что нет. Но сам до конца всё-таки прочитал и, как видите, книга даже пробудила во мне достаточно эмоций, чтобы оставить о ней развернутый отзыв. А в конце концов, разве не это — главное?

Каллистов Дмитрий Павлович | СПбИИРАН

Каллистов Дмитрий Павлович

(18. 01.1904, Варшава — 2.03.1973, Ленинград), историк античности, переводчик, д.и.н., профессор. В 1924 окончил факультет общественных наук, а в 1927 (экстерном) – факультет советского права Ленинградского государственного университета. Работал лектором и помощником юрисконсульта в профсоюзных организациях Ленинграда. В 1928 репрессирован. В 1934-1937 аспирант Института истории материальной культуры. С июня 1938 по март 1973 – старший научный сотрудник ЛОИИ (в мае 1953 — июле 1955 старший научный сотрудник Ленинградского отделения Института истории материальной культуры АН СССР). Профессор кафедры истории Древней Греции и Рима исторического факультета (НИАСПбИИ РАН. Ф. СПбИИ РАН. Оп. 2. Ч. II. Д. 121).

Основные труды

Очерки по истории Северного Причерноморья античной эпохи / Д. П. Каллистов ; ЛГУ им. А. А. Жданова. — Л.: Изд-во ЛГУ, 1949. — 287 с.
Северное Причерноморье в античную эпоху. — Л., 1952. — 187 с.
Каллистов Д. П., Нейхардт А. А., Шифман И. Ш., Шишова И. А. Рабство на периферии античного мира / отв. ред. Д. П. Каллистов. — Л., 1968. — 271 с. (в сер. «Исследования по истории рабства в античном мире»)

Каллистов Д. П. Античный театр. — Л., 1970. — 175 с.
Доватур А. И. Каллистов Д. П., Шишова И. А. Народы нашей страны в «Истории» Геродота: Тексты, перевод, комментарий. — М.: Наука, 1982. — 455 с. (в сер. «Древнейшие источники по истории народов СССР»).

Библиография
Алпатов В. М. О матери (Воспоминания о Зинаиде Владимировне Удальцовой) // Новая и новейшая история. — 2008. — № 6.
Лихачев Д. С. Воспоминания. — СПб.: Logos, 1995. — С. 277—283. — 519 с.
Фролов Э. Д. Профессор Дмитрий Павлович Каллистов (1904-1973). Штрихи к портрету // МНЕМОН Исследования и публикации по истории античного мира : Под ред. проф. Э. Д. Фролова. — СПб.: СПбГУ, 2013. — Вып. 13. — С. 433—446.

7. Учебно-методическое и информационное обеспечение дисциплины «История государства и права зарубежных стран»

а) Основная литература (учебники и учебные пособия):

Александров С. В. История государства и права зарубежных стран: учебно-методическое пособие. Тула, 2001.

Аннерс Э. История европейского права. М., 1996.

Бельсон Я.М., Ливанцев К.Е. История государства и права США. Учебное пособие для вузов. Л., 1982.

Берман Г.Дж. Западная традиция права: эпоха формирования. М., 1994

Боронбеков С. Шариат. М., 2002.

Всемирная история государства и права. Энциклопедический словарь. — М., 2005.

Гражданское и торговое право капиталистических государств / Отв. ред. Р.Л. Нарышкина. М., 1983.

Дигесты Юстиниана. Т. 1-8. М., 2001-2006

Законодательство зарубежных стран по социальному обслуживанию населения. М., 1994.

Л.В.С.Ван ден Берг. Основные начала мусульманского права согласно учению имамов Абу Ханифы и Шафии. М., 2005.

Мальцев Г.В. Пять лекций о происхождении и ранних формах права и государства. М., 2000.

Медведев И.П. Византийская правовая культура. СПб., 2001

Мисроков З.Х. Адатское и мусульманское право в российской правовой системе. Нальчик, 2001.

Муравский В.А. Закон и актуальное право в правовых системах стран древнего мира. Екатеринбург, 1996.

Очерк кодификации и новеллизации буржуазного гражданского права/ Под ред. З.М. Черниловского. М.,1983.

Очерки кодификации и новеллизации буржуазного гражданского права. М., 1983

Право в средневековом мире. Отв. Ред. О. Варьяш. М., 1996

Пти-Дютайи Ш. Феодальная монархия во Франции и в Англии X – XIII веков. СПб., 2001

Рене Давид. Основные правовые системы современности. М.,1992.

Сюкияйнен Л.Р. Мусульманское уголовное право: Теоретические основы и современная практика // Современное уголовное право и криминология. Сборник научных трудов. М., 2007.

Сюкияйнен Л. Р. Шариат и мусульманско-правовая культура. М., 1997.

Сюкияйнен Л.Р. Шариат: религия, нравственность, право // Государство и право, 1996, № 8.

Топорнин Б.Н. Европейское право. М., 1998.

Черниловский З.М. Всеобщая история государства и права. М.,2002.

Черняк Е.Б. Судебная петля. Секретная история политических процессов на западе. М.,1991.

Меньшикова А.А. ПОПЫТКИ АДМИНИСТРАТИВНОГО РЕФОРМИРОВАНИЯ НА НАЧАЛЬНОМ ЭТАПЕ «НОВОГО КУРСА» Ф.Д. РУЗВЕЛЬТА (1933-1935 ГГ.)/ Меньшикова А.А.// Электронный журнал — [Власть.] – 2010. – № 11 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=15513039

Епифанова И.В. ЖЕНСКОЕ ДВИЖЕНИЕ В США В ЭПОХУ «НОВОГО КУРСА» Ф.Д. РУЗВЕЛЬТА (1930-1940-Е ГОДЫ)./ Епифанова И.В.// Электронный журнал — [Ученые записки Казанского университета. Серия: Гуманитарные науки.] – 2008. – № 1 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=11482146

Ковалев М. В. К ВОПРОСУ О ТРАНСФОРМАЦИИ ПОЛИТИЧЕСКОГО РЕЖИМА В ГОДЫ «НОВОГО КУРСА» Ф. РУЗВЕЛЬТА В США./ Ковалев М.В.// Электронный журнал — [Вестник Башкирского университета.] – 2012. – № 1 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=18016813

Миряшева Е.В. АВТОРЫ КОНСТИТУЦИИ 1787 Г. О КОМПРОМИССНОМ ХАРАКТЕРЕ ОСНОВНОГО ЗАКОНА США ИЛИ «О ЧЕМ ГОВОРЯТ ЗАПИСКИ ФЕДЕРАЛИСТА»/ Миряшева Е.В.// Электронный журнал — [Пробелы в российском законодательстве.] – 2010. – № 2 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=15273572

Баранов В.М. ОСОБЕННОСТИ РАЗРАБОТКИ И ПРИНЯТИЯ КОНСТИТУЦИИ ЕВРОПЫ В СРАВНИТЕЛЬНОМ АНАЛИЗЕ С ПРОЦЕССОМ ПОДГОТОВКИ И РАТИФИКАЦИИ КОНСТИТУЦИИ США./ Баранов В.М.// Электронный журнал — [Юристъ — Правоведъ.] – 2007.–№3 URL : http://elibrary.ru/item.asp?id=15195014

Кикоть-Глуходедова Т.В. ОСОБЕННОСТИ СОЗДАНИЯ КОНСТИТУЦИИ В США./ Кикоть-глуходедова Т. В.// Электронный журнал — [Вестник Московского университета МВД России.] – 2011.–№ 7 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=17184473

Миряшева Е.В.ПРЕДПОСЫЛКИ ПРИНЯТИЯ КОНСТИТУЦИЙ ШТАТОВ США./ Миряшева Е.В.// Электронный журнал — [Известия Пензенского государственного педагогического университета им. В.Г. Белинского.] – 2012.–№ 28 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=18241514

Мележик И.Н. ПОЛИТИКО-ПРАВОВЫЕ ИДЕИ АНГЛИЙСКОЙ БУРЖУАЗНОЙ РЕВОЛЮЦИИ./ Мележик И.Н.// Электронный журнал — [Вестник Московского государственного лингвистического университета.]– 2010. – № 594 URL:http://elibrary.ru/item.asp?id=17111078

Кирьянова Е.А. КОРОЛЬ И МОНАРХИЧЕСКАЯ ВЛАСТЬ В ИНАУГУРАЦИОННЫХ ПРОПОВЕДЯХ В ПЕРИОД АНГЛИЙСКОЙ РЕВОЛЮЦИИ./ Кирьянова Е.А// Электронный журнал — [Средние века.]– 2011. – № 1-2 URL: http://elibrary. ru/item.asp?id=16910144

Александрова С.П. ИЗМЕНЕНИЕ ФОРМЫ ПРАВЛЕНИЯ В АНГЛИИ В ПЕРВЫЕ ДВА ГОДА АНГЛИЙСКОЙ БУРЖУАЗНОЙ РЕВОЛЮЦИИ XVII ВЕКА./ Александрова С.П.// Электронный журнал — [Юридическая мысль.]– 2012. – № 1 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=17683059

Щелокова Н.В. ИДЕОЛОГИЧЕСКИЕ ПРЕДПОСЫЛКИ АНГЛИЙСКОЙ РЕВОЛЮЦИИ: УЧЕНИЕ ДЖОНА ВИКЛИФА О ВЛАСТИ./ Щелокова Н.В.// Электронный журнал — [Мир науки, культуры, образования.] – 2011. – № 4-2 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=17826195

Балушкина Е.В. ПОЛИТИЧЕСКИЙ СЛОВАРЬ ОЛИВЕРА КРОМВЕЛЯ./ Балушкина Е.В.// Электронный журнал — [Вестник Российского государственного гуманитарного университета.] – 2012. – № 9. URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=17820497

Шаповалова Е.В. ГЕНДЕРНЫЙ АСПЕКТ МОНАСТЫРСКОЙ РЕФОРМЫ ВО ФРАНЦИИ: ПОЗИЦИЯ КАРДИНАЛА РИШЕЛЬЕ. / Шаповалова Е.В.// Электронный журнал — [Вестник Российского государственного гуманитарного университета.]–2012.–№311 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=18037737

Логинова Т.Е. ХАРАКТЕРИСТИКА НОРМ УГОЛОВНО-ПРОЦЕССУАЛЬНОГО ПРАВА В «КАРОЛИНЕ»./ Логинова Т.Е.// Электронный журнал — [Вестник Пермского университета. Юридические науки.] – 2010.– №3 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=15539814

Логинова Т.Е. ИСТОРИЯ РАЗВИТИЯ НОВОГО ТИПА УГОЛОВНОГО ПРОЦЕССА В СРЕДНЕВЕКОВОЙ ГЕРМАНИИ/ Логинова Т.Е.// Электронный журнал — [Вестник Пермского университета. Юридические науки.] – 2009.– №3 URL:http://elibrary.ru/item.asp?id=12944034

Вяхирева Г.Д. ИСТОРИЯ ТЕЛЕСНЫХ НАКАЗАНИЙ В ЗАРУБЕЖНЫХ СТРАНАХ./ Вяхирева Г.Д.// Электронный журнал — [Вестник Владимирского юридического института.] – 2010.– №3 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=15511857

Астафьев И. М. ВЕЛИКАЯ ХАРТИЯ 1215 Г.: АНГЛИЙСКИЙ МИФ./ Астафьев И.М//Электронный журнал — [Вестник Тамбовского университета. Серия: Гуманитарные науки.] –2009.–№11 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=13068006

Долиновский С.Л. СТАНОВЛЕНИЕ И РАЗВИТИЕ ПАРЛАМЕНТСКОЙ МОНАРХИИ В ВЕЛИКОБРИТАНИИ/ Долиновский С.Л.// Электронный журнал — [История государства и права.] –2008.–№17 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=11529841

Смирнов Е.Р. О СТРУКТУРИРОВАНИИ АНГЛИЙСКОГО ПАРЛАМЕНТА В XIII-XIV ВВ. (ГОСУДАРСТВЕННО-ПРАВОВОЙ АСПЕКТ)./ Смирнов Е.Р.// Электронный журнал — [Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского. Серия: Право.] – 2001.–№1 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=9119876

Фалалеева И.Н. ПРАВОВАЯ ОБРЯДНОСТЬ У САЛИЧЕСКИХ ФРАНКОВ: ПОПЫТКА ИНТЕРПРЕТАЦИИ. / Фалалеева И.Н.// Электронный журнал — [Вестник Волгоградского государственного университета. Серия 5: Юриспруденция.] – 2009. – № 11 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=13091439

Полякова Н. ОСНОВНЫЕ ТЕНДЕНЦИИ РАЗВИТИЯ ЕВРОПЕЙСКОГО РАННЕФЕОДАЛЬНОГО ГРАЖДАНСКОГО ПРАВА. НА ПРИМЕРЕ ЮЖНОСЛАВЯНСКИХ И ГЕРМАНСКИХ НАРОДОВ. ПО ДАННЫМ ЗЕМЛЕДЕЛЬЧЕСКОГО ЗАКОНА И САЛИЧЕСКОЙ ПРАВДЫ./ Полякова Н.// Электронный журнал — [Закон и право.] – 2007. – № 9 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=11781942

Медведев В.Г.РИМСКОЕ ПУБЛИЧНОЕ ПРАВО КОНЦА ПРИНЦИПАТА./ Медведев В.Г.// Электронный журнал — [Вектор науки Тольяттинского государственного университета.] – 2010. – № 1. URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=16901287

Игнатенко А.В. КРИЗИС РИМСКОЙ РЕСПУБЛИКИ (ИСТОРИКО-ТЕОРЕТИЧЕСКИЙ АСПЕКТ)./Игнатенко А.В.// Электронный журнал — [Российский юридический журнал. ] – 2006. – № 2. URL:http://elibrary.ru/item.asp?id=11749228

Дрязгунов К.В. ПРИЧИНЫ ПАДЕНИЯ ЗАПАДНОЙ РИМСКОЙ ИМПЕРИИ./

Дрязгунов К.В.// Электронный журнал — [Актуальные проблемы гуманитарных и естественных наук.] – 2009. – № 10 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=13070925

Камнев С.Н. ЭДУАРД ГИББОН О РОЛИ ХРИСТИАНСТВА В УПАДКЕ И КРУШЕНИИ ЗАПАДНОЙ РИМСКОЙ ИМПЕРИИ./ Камнев С.Н. // Электронный журнал — [Омский научный вестник.] – 2010. – № 2-86 URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=16106655

Вержбицкий К.В.РЕСПУБЛИКАНСКИЕ ТРАДИЦИИ И ИМПЕРСКИЕ НОВАЦИИ В СИСТЕМЕ ПРИНЦИПАТА АВГУСТА./ Электронный журнал — [Мнемон: Исследования и публикации по истории античного мира.] – 2011. – № 10. URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=16995408

Вержбицкий К. В.РЕСПУБЛИКАНСКИЕ ТРАДИЦИИ И ИМПЕРСКИЕ НОВАЦИИ В СИСТЕМЕ ПРИНЦИПАТА АВГУСТА./ Электронный журнал — [Мнемон: Исследования и публикации по истории античного мира.] – 2011. – № 10. URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=16995408

Евсеенко Т.П. РИМСКАЯ РЕСПУБЛИКА КАК СЮЗЕРЕННОЕ ГОСУДАРСТВО./

Евсеенко Т.П.// Электронный журнал — [Вестник Удмуртского университета.] – 2009. – № 5-2. URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=12996664

Медведев В.Г., Медведев Е.В.ОСНОВНЫЕ ЧЕРТЫ И ЭТАПЫ РАЗВИТИЯ РИМСКОГО УГОЛОВНОГО ПРАВА./ Медведев В.Г., Медведев Е.В.// Электронный журнал — [Евразийский юридический журнал.] – 2010. — № 26. URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=15119572

Медведев В.Г. КЛАССИФИКАЦИЯ ПРАВ НА ВЕЩИ В ДРЕВНЕМ РИМЕ. ПОНЯТИЕ И ВИДЫ ВЕЩЕЙ. /Медведев В.Г.// Электронный журнал — [Вектор науки Тольяттинского государственного университета.] – 2009. — № 4. URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=12896267

Медведев В.Г. СУБЪЕКТЫ ПРАВА В ДРЕВНЕМ РИМЕ./ Медведев В.Г.// Электронный журнал — [Вектор науки Тольяттинского государственного университета.] – 2009. — № 5. URL: http://elibrary.ru/item.asp?id=17914991

в) программное обеспечение и Интернет-ресурсы:

Журнал ‘Актуальные проблемы российского права’

Пересмотр судебных решений в Древней Греции и Древнем Риме
Review Of Judgements In Ancient Greece And Ancient Rome

Опубликовано в номере 10 за 2016 год

DOI: 10.17803/1994-1471.2016.71.10.138-146

Автор: Панокин А. М. / Author: Panokin A. M.

Рубрика: Уголовный процесс

Основой для изучения пересмотра судебных решений в Древней Греции и Древ- нем Риме послужило отнесение их уголовного процесса к обвинительному типу, которому соответствует определенная модель обжалования, обусловленная содержанием данного исторического типа уголовного процесса. Проведенное исследование позволило прийти к выводу, что апелляция изначально возникает в качестве средства политической борьбы (например, плебеев против патрициев), а не правового института пересмотра судебных решений. Народное собрание во многих случаях является высшей судебной инстанцией, наделенной полномочиями по апелляционному пересмотру. Впоследствии апелляционные полномочия от народного собрания переходят к другим органам государственной власти. Должностные лица, осуществляющие функции суда апелляционной инстанции, выполня- ют, как правило, и другие государственные функции. Правом апеллировать наделены не только стороны судебного разбирательства, но и любые другие граждане. Пересмотр судебных решений характеризуется как «суд с судьей», а не продолжение спора сторон.
The basis for the study of review of judgments in Ancient Greece and Ancient Rome was the assignment of their criminal procedure for indictable type, which corresponds to a certain model of appeal arising from the content of the historical type of criminal procedure. This study made it possible to conclude that the appeal arose originally as a means of political struggle (for example, the plebeians against patricians) rather than legal institution of review of judgements. In many cases, the people’s Assembly is the highest judicial body, empowered to appellate decisions. Subsequently, the appellate authority of the people’s Assembly shall be transferred to other government authorities. Officials carrying out the function of the appellate court, carry out, as a general rule, other public functions. The right to appeal is vested not only in the party to the trial, but in any other citizens. The review of judgments is characterized as a «Court with the judge», but not as a continuation of the dispute between the parties.

Открыть во весь экран

Количество просмотров статьи (c 01/12/2014): 1749

апелляция, пересмотр судебных решений, обжалование, Древняя Греция, Древний Рим, обвинительный тип процесса, уголовный процесс, уголовное судопроизвод- ство.
an appeal, review of judgments, appeal, Ancient Greece, Ancient Rome, accusatorial type of procedure, criminal procedure, criminal proceedings.

1. Азаревич Д. Патриции и плебеи в Риме. Историко-юридическое исследование. — Т. I—II. — СПб., 1875. — 569 с. 2. Аристотель. Афинская полития. Государственное устройство афинян. — 2-е изд. — М., 1937. — 255 с. 3. Бузескул В. П. История афинской демократии. — СПб., 2003. — 480 с. 4. Воскобитова Л. А. Судебная власть: возникновение, развитие, типология. — Ставрополь, 2001. — 128 с. 5. Дементьева В. В. Государственность ранней Римской республики в концепции Теодора Моммзена // Материалы Всероссийской научной конференции, посвященной 200-летию Ярославского государ- ственного университета имени П. Г. Демидова. — Ярославль, 2003. — С. 3—7. 6. Джонс А. Х. М. Гибель античного мира. — Ростов н/Д, 1997. — 576 с. 7. Дигесты Юстиниана. — Т. I. — Кн. I—IV. — М., 2002. — 584 с. 8. Дионисий Галикарнасский. Римские древности : в 3 т. — Т. II. — М., 2005. — 274 с. 9. Егоров А. Б. Римское государство и право. Эпоха империи. — СПб., 2013. — 248 с. 10. Князькин И. О. Император Диоклетиан и конец античного мира (Государственные и правовые рефор- мы начала Домината). — М., 1999. — 220 с. 11. Кофанов Л. Л. Lex Valeria de provocatione 509 г. до н. э. и начало разделения римского права на пу- бличное и частное // Древнее право. Ivs antiqvvm. — 2001. — № 1 (8). — С. 31—36. 12. Кофанов Л. Л. Древнегреческое право и законы XII таблиц: проблемы заимствований и влияния // Древнее право. Ivs antiqvvm. — 2002. — № 1 (9). — С. 38—50. 13. Кофанов Л. Л. Характер царской власти в Риме VIII—VI вв. до н. э. // Антиковедение и медиевистика: сборник научных трудов. — Вып. 3. — Ярославль, 2001. — С. 14—24. 14. Кудрявцева Т. В. Гелиэя в контексте афинских державных отношений // Мнемон : Исследования и публикации по истории античного мира. — Вып. 6. — СПб., 2007. — С. 23—40. 15. Кудрявцева Т. В. Народный суд и афинская демократия : автореф. дис. … д-ра истор. наук. — СПб., 2008. — 42 с. 16. Пальцева Л. А. Судопроизводство в Греции VII—VI вв. до н. э. (по данным эпиграфических источни- ков) // Вестник Санкт-Петербургского университета. — Сер. 2 : История. — 2011. — Вып. 1. — С. 17—24. 17. Плутарх. Попликола // Сравнительные жизнеописания : в 3 т. — М., 1961. — Т. I. — С. 127—142. 18. Плутарх. Солон // Сравнительные жизнеописания : в 3 т. — М., 1961. — Т. I. — С. 102—126. 19. Рузин П. А. Вольноотпущенники в системе бюрократического аппарата Клавдия // Мнемон : Исследо- вания и публикации по истории античного мира. — Вып. 7. — СПб., — 2008. — С. 235—244. 20. Сенека. Нравственные письма к Луцилию. — М., 1977. — 386 с. 21. Случевский В. К. Учебник русского уголовного процесса. — М., 2008. — Ч. II : Судопроизводство. — 488 с. 22. Смышляев А. Л. Септимий Север и римская юриспруденция // Известия высших учебных заведений. Правоведение. — 1975. — № 5. — С. 62—69. 23. Строгецкий В. М. Полис и империя в классической Греции. — Н. Новгород, 1991. — 244 с. 24. Тит Ливий. История Рима от основания города : в 3 т. — М., 1989. — Т. I. — 576 с. 25. Фойницкий И. Я. Курс уголовного судопроизводства : в 2 т. — СПб., 1996. — Т. II. — 606 с. 26. Цицерон. О государстве // Диалоги. — М., 1966. — С. 7—86. 27. Якобсон В. А. Законы Хаммурапи как источник по истории Древней Месопотамии : автореф. дис. … д-ра истор. наук. — Л., 1988. — 41 с.
1. Azarevich D. Patricii i plebei v Rime. Istoriko-juridicheskoe issledovanie. — T. I—II. — SPb., 1875. — 569 s. 2. Aristotel’. Afinskaja politija. Gosudarstvennoe ustrojstvo afinjan. — 2-e izd. — M., 1937. — 255 s. 3. Buzeskul V. P. Istorija afinskoj demokratii. — SPb., 2003. — 480 s. 4. Voskobitova L. A. Sudebnaja vlast’: vozniknovenie, razvitie, tipologija. — Stavropol’, 2001. — 128 s. 5. Dement’eva V. V. Gosudarstvennost’ rannej Rimskoj respubliki v koncepcii Teodora Mommzena // Materialy Vserossijskoj nauchnoj konferencii, posvjashhennoj 200-letiju Jaroslavskogo gosudarstvennogo universiteta imeni P. G. Demidova. — Jaroslavl’, 2003. — S. 3—7. 6. Dzhons A. H. M. Gibel’ antichnogo mira. — Rostov n/D, 1997. — 576 s. 7. Digesty Justiniana. — T. I. — Kn. I—IV. — M., 2002. — 584 s. 8. Dionisij Galikarnasskij. Rimskie drevnosti : v 3 t. — T. II. — M., 2005. — 274 s. 9. Egorov A. B. Rimskoe gosudarstvo i pravo. Jepoha imperii. — SPb., 2013. — 248 s. 10. Knjaz’kin I. O. Imperator Diokletian i konec antichnogo mira (Gosudarstvennye i pravovye reformy nachala Dominata). — M., 1999. — 220 s. 11. Kofanov L. L. Lex Valeria de provocatione 509 g. do n. je. i nachalo razdelenija rimskogo prava na publichnoe i chastnoe // Drevnee pravo. Ivs antiqvvm. — 2001. — № 1 (8). — S. 31—36. 12. Kofanov L. L. Drevnegrecheskoe pravo i zakony XII tablic: problemy zaimstvovanij i vlijanija //Drevnee pravo. Ivs antiqvvm. — 2002. — № 1 (9). — S. 38—50. 13. Kofanov L. L. Harakter carskoj vlasti v Rime VIII—VI vv. do n. je. // Antikovedenie i medievistika: sbornik nauchnyh trudov. — Vyp. 3. — Jaroslavl’, 2001. — S. 14—24. 14. Kudrjavceva T. V. Gelijeja v kontekste afinskih derzhavnyh otnoshenij // Mnemon : Issledovanija i publikacii po istorii antichnogo mira. — Vyp. 6. — SPb., 2007. — S. 23—40. 15. Kudrjavceva T. V. Narodnyj sud i afinskaja demokratija : avtoref. dis. … d-ra istor. nauk. — SPb., 2008. — 42 s. 16. Pal’ceva L. A. Sudoproizvodstvo v Grecii VII—VI vv. do n. je. (po dannym jepigraficheskih istochnikov) // Vestnik Sankt-Peterburgskogo universiteta. — Ser. 2 : Istorija. — 2011. — Vyp. 1. — S. 17—24. 17. Plutarh. Poplikola // Sravnitel’nye zhizneopisanija : v 3 t. — M., 1961. — T. I. — S. 127—142. 18. Plutarh. Solon // Sravnitel’nye zhizneopisanija : v 3 t. — M., 1961. — T. I. — S. 102—126. 19. Ruzin P. A. Vol’nootpushhenniki v sisteme bjurokraticheskogo apparata Klavdija // Mnemon : Issledovanija i publikacii po istorii antichnogo mira. — Vyp. 7. — SPb., — 2008. — S. 235—244. 20. Seneka. Nravstvennye pis’ma k Luciliju. — M., 1977. — 386 s. 21. Sluchevskij V. K. Uchebnik russkogo ugolovnogo processa. — M., 2008. — Ch. II : Sudoproizvodstvo. — 488 s. 22. Smyshljaev A. L. Septimij Sever i rimskaja jurisprudencija // Izvestija vysshih uchebnyh zavedenij. Pravovedenie. — 1975. — № 5. — S. 62—69. 23. Strogeckij V. M. Polis i imperija v klassicheskoj Grecii. — N. Novgorod, 1991. — 244 S. 24. Tit Livij. Istorija Rima ot osnovanija goroda : v 3 t. — M., 1989. — T. I. — 576 s. 25. Fojnickij I. Ja. Kurs ugolovnogo sudoproizvodstva : v 2 t. — SPb., 1996. — T. II. — 606 s. 26. Ciceron. O gosudarstve // Dialogi. — M., 1966. — S. 7—86. 27. Jakobson V. A. Zakony Hammurapi kak istochnik po istorii Drevnej Mesopotamii : avtoref. dis. … d-ra istor. nauk. — L., 1988. — 41 s.

нет данных

Журнал ЧЕРНЫЕ МЕТАЛЛЫ

Подробная информация о научном журнале «ЧЕРНЫЕ МЕТАЛЛЫ»: официальный сайт, ISSN, индексация в ВАК и РИНЦ. Данные могут быть неактуальными.

Название	ЧЕРНЫЕ МЕТАЛЛЫ
Издательство	Закрытое акционерное общество «Издательский дом «Руда и металлы»
Др. названия	—
Основание	1961
Языки	—
Рецензии	—
Вид рецензий	—
Перевод	Stahl und Eisen
Сокращение	—
Страна	Россия
Город	Москва
ISSN	0132-0890
Онлайн ISSN	—
Сайт	http://www. rudmet.ru/catalog/journals/5
Email	—
Англ. ISSN	—
Англ. название	—
Web of Science	нет
Scopus	да
РИНЦ	да
ВАК	включен
Базы данных	—
Реферативный	нет
Мультидисцип.	нет
Рубрики и коды 53.31.00 Производство черных металлов и сплавов
Описание Российско-немецкое издание ЕЖЕМЕСЯЧНЫЙ ЖУРНАЛ Издается с 1961 года Тематическое содержание журнала: — Новости металлургии по странам и регионам — Что обсуждают металлурги? — Развитие металлургии в России и странах СНГ — Производство чугуна и стали — Непрерывная разливка стали — Производство проката — Термическая обработка и нанесение покрытий — Энергетика и экология — Металлургия и автомобилестроение — Контроль, организация и управление производством — Экономика и финансы — Производство стали по странам и регионам — Новости науки и техники за рубежом — Из истории металлургии 119049, Москва, а/я 71 Тел. /факс: (495) 955-00-09, 230-45-18 E-mail: [email protected] www.rudmet.ru

Мифология, теология и историософия царской власти в Египте | Александрова

1. Ассман Я. Египет: теология и благочестие ранней цивилизации. М.: Присцельс, 1999.

2. Baadsgaard, A., Monge, J., Cox, S., & Zettler, R.L. (2011) “Human sacrifice and intentional corpse preservation in the Royal Cemetery of Ur”, Antiquity, 85(327): 27–42.

3. Morris, E.F. (2013) “(Un)Dying Loyalty: Meditations on Retainer Sacrifice in Ancient Egypt and Elsewhere” in Violence and civilization: Studies of social violence in history and prehistory, pp. 61–93. Oxford and Oakville: Oxbow Books.

4. Dickson, D.B. (2014) “Kingship as RacketeeringThe Royal Tombs and Death Pits at Ur, Mesopotamia, Reinterpreted from the Standpoint of Conflict Theory” in Experiencing Power, Generating AuthorityCosmos, Politics, and the Ideology of Kingship in Ancient Egypt and Mesopotamia (pp. 311–328). Philadelphia: University of Pennsylvania Press.

5. Ладынин И.А. Основные этапы царского культа Птолемеев в контексте общей эволюции египетского эллинизма // Мнемон: Исследования и публикации по истории античного мира. 2004. Вып. 3. С. 145–184.

6. Ладынин И.А. Статуя Дария I из Суз: к интерпретации памятника в свете религиозно-идеологических представлений Египта и Переднего Востока // Вестн. Древней истории. 2011. № 1 (276). С. 3–27.

7. Ладынин И.А. «Соколы-Нектанебы»: скульптурные изображения Нектанеба II перед богом Хором и их концепция // Вестн. Древней истории. 2009. № 4 (271). С. 3–22.

8. Hoven, C. (2017). The coronation ritual of the falcon at Edfu: Tradition and innovation in ancient Egyptian ritual composition. PhD Thesis, Leiden University and École Pratique des Hautes Études.

Мнемон Медицинское определение | Медицинский словарь Merriam-Webster

мнн · пн | \ Nē-ˌmän \

Медицинское определение

мнемона

: теоретическая основная единица памяти

мнемоник — Викисловарь

Английский [править]

Альтернативные формы [править]

Этимология [править]

От латинского mnēmonicus , от древнегреческого μνημονικός (mnēmonikós, «памяти»), от μνήμων (mnḗmōn, «запоминание, памятование»), от μνάομαι (mnáomai), от μνάομαι (mnáomai), от Протоиндоевропейские * мужчины — («думать»); видеть ум.

Произношение [править]

Прилагательное [править]

мнемоника ( не сопоставимо )

Мнемоника или относящаяся к ней: изучение техник для более легкого запоминания чего-либо.
Относящиеся к памяти.

Переводы [править]

Существительное [править]

мнемоника ( множественное число мнемоника )

Что-нибудь (особенно что-то в устной форме), помогающее что-то запомнить.
Чтобы запомнить цвета радуги, используйте мнемонику «Ричард Йоркский дал битву напрасно» (красный, оранжевый, желтый, зеленый, синий, индиго, фиолетовый).
- 2003 , Алекс Кимбелл, Непреодолимая граница (стр. 54)
  Мистер Эйвери был большим сторонником мнемоники ; у него был по одному для всех возможных аспектов полета — это был лучший способ для пилотов-студентов ознакомиться с их новой средой […]
(вычисления) Текстовая, удобочитаемая форма инструкции на языке ассемблера, не включая операнды.

Синонимы [править]

Производные термины [править]

Переводы [править]

все, что помогает вспомнить

Связанные термины [править]

См. Также [править]

Ссылки [править]

Дуглас Харпер, «мнемонический», в Интернет-этимологическом словаре , 2001–2021 гг.
Седьмой новый университетский словарь Вебстера , Спрингфилд, Массачусетс, G. & C. Merriam Co., 1967
в The Century Dictionary , New York, N.И .: The Century Co., 1911.

Механизм предотвращения трансформации мнемона Whi3 в прион

Abstract

В ответ на обманчивое ухаживание, почкующиеся дрожжевые клетки избегают вызванной феромоном остановки клеточного цикла за счет слияния ингибитора G1 / S Whi3 в доминантную неактивную суперсборку. Поразительно, но суперсборки Whi3 остаются стабильными на протяжении многих клеточных циклов в материнских клетках и не передаются дочерним клеткам. Таким образом, слияние Whi3 кодирует память, наделяя ее свойством мнемона (Whi3 ^mnem), белка, конформационные изменения которого сохраняют свойство, которое является постоянным в материнской клетке, но не наследуется дочерними клетками.Мнемоны обладают общими структурными особенностями с прионами, которые представляют собой самозаменяющиеся белковые конформации, наследуемые дочерними клетками. Тем не менее, как достигается сохранение и асимметричное наследование Whi3 ^mnem, неизвестно. Здесь мы сообщаем, что Whi3 ^mnem тесно связан с мембранами эндоплазматического ретикулума (ER) и сохраняется в материнской клетке за счет присутствия латеральных мембранных диффузионных барьеров на шейке зачатка. Поразительно, что барьерные дефекты заставили Whi3 ^mnem распространяться митотически стабильным образом, как прион.Подобно Whi3 ^mnem, для превращения Whi3 в прион требовался его полиглутаминовый прионоподобный домен. Таким образом, мы предполагаем, что Whi3 ^mnem находится в состоянии самотемплинга, обеспечивая временную стабильность памяти, которую он кодирует, в то время как его закрепление в разделенных мембранах ER обеспечивает его ограничение в материнской клетке и предотвращает его инфекционное распространение. Эти результаты предполагают, что замкнутая суперсборка с самовозбуждением является мощным механизмом для долговременного кодирования информации.

Введение

Прионы — это белки, которые могут принимать несколько конформаций, по крайней мере, с одной из них, которая является самовоспроизводящейся, что придает ей самовоспроизводящийся характер. Конверсия прионов важна для физиологических процессов, включая врожденный иммунитет (Hou et al., 2011) и формирование фенотипического разнообразия одноклеточных организмов от бактерий до дрожжей (Coustou et al., 1997; True and Lindquist, 2000; Yuan and Hochschild , 2017). Помимо физиологии, прионы были первоначально открыты как возбудители разрушительных заболеваний у людей (Куру, болезнь Крейтцфельдта-Якоба) и животных (губчатая энцефалопатия Скрепи и крупного рогатого скота) (Prusiner, 1982).Более того, прионоподобное поведение различных белков может быть связано с другими заболеваниями, включая болезни Альцгеймера и Паркинсона (Goedert, 2015), а также с устойчивостью к противогрибковым препаратам (Suzuki et al. , 2012). Какие механизмы контролируют прионы и, в частности, их самотемпелирующую активность, все еще остается открытым вопросом.

Прионы представляют собой обычные белковые элементы, и некоторые из них были идентифицированы в почкующихся дрожжах S. cerevisiae (Wickner et al., 2015), что позволяет провести обширные исследования для понимания их регуляции и функции (Harvey et al., 2018). Белок Sup35 может принимать конформацию с образованием приона [ PSI +], наиболее охарактеризованного на сегодняшний день (Tuite and Cox, 2006). Sup35 является терминатором трансляции, который теряет свою функцию в своей форме [ PSI +], что приводит к считыванию стоп-кодона и фенотипическому разнообразию (True and Lindquist, 2000). Важно отметить, что Sup35 содержит прионоподобный домен, определяемый как богатый остатками глутамина и аспарагина (Q / N) и лишенный заряженных и гидрофобных остатков (Alberti et al., 2009).Этот домен управляет состоянием приона Sup35 за счет принятия самовоспроизводящейся конформации (Serio et al. , 2000) и опосредуя сборку Sup35 в амилоидные фибриллы. После образования фибриллы, образованные белком Sup35, фрагментируются на более мелкие семена с помощью белковой дезагрегазы Hsp104 (Narayanan et al., 2006). Самостоятельная активность прионных семян превращает большую часть белкового пула в прионную форму, и семена могут свободно диффундировать к дочерним клеткам. Следовательно, прионы ведут себя как инфекционные частицы, устанавливая [ PSI +] не только в клетке, в которой они возникли, но также и во всех ее дочерних клетках и, следовательно, в растущей колонии.In silico анализ протеома дрожжей идентифицировал около 200 белков в S. cerevisiae , содержащих потенциальный прионоподобный домен (Alberti et al., 2009). Однако мы до сих пор не знаем, все ли прионоподобные домены могут принимать самошаблонные конформации и все ли эти белки функционируют как прионы.

Whi3 содержит два прионоподобных домена, состоящих из полос, богатых PolyQ и PolyN (Alberti et al. , 2009; Caudron and Barral, 2013). Whi3 представляет собой связывающий мРНК белок, участвующий во времени перехода G1 / S клеточного цикла и в контроль размера клеток в S.cerevisiae (Garì et al., 2001). Наиболее изученной функцией Whi3 является регуляция перехода G1 / S клеточного цикла посредством связывания и ингибирования трансляции мРНК, кодирующей циклин G1 CLN3 . Это ингибирование обеспечивает задержку перехода в S-фазу до тех пор, пока клетки не достигнут критического размера. Прионоподобные домены Whi3 необходимы для Whi3, чтобы принять конформацию, которая снимает ингибирование Whi3 на мРНК CLN3 и делает возможным длительное фенотипическое переключение.Под воздействием феромона спаривания гаплоидные дрожжевые клетки останавливаются в фазе G1 клеточного цикла и растут в направлении источника феромона. Эта цитоплазматическая проекция называется шму. После длительного воздействия феромона без досягаемости партнера по спариванию дрожжевые клетки становятся невосприимчивыми к сигналу феромона и возобновляют свой клеточный цикл (Caudron and Barral, 2013; Moore, 1984). Они переходят из фазы шмутирования в фазу бутонизации. Примечательно, что после установления это состояние, рефрактерное к феромонам, становится стабильным, предоставляя клетке память о том, что у нее нет доступного партнера.Как следствие, эти клетки продолжают отрастать до конца своей жизни даже в присутствии феромона спаривания. Поразительно, что дочерние клетки не наследуют эту адаптацию и восстанавливают свою способность шму в ответ на феромон после отделения от своей материнской клетки (Caudron and Barral, 2013). Прионоподобные домены Whi3 запускают как выход из ареста феромонов, так и состояние памяти, опосредуя конденсацию Whi3 в суперсборки.

Организация домена

Whi3s и способность переключаться между растворимой и конденсированной фазами являются чертами, общими для прионов, таких как Sup35.Состояние рефрактерности к феромонам очень стабильно после того, как оно установлено, даже когда феромон удален из среды. Удаление любого прионоподобного домена Whi3 приводит к позднему уходу от ареста феромона, который не поддерживается стабильно в материнских клетках. Другими словами, в присутствии феромона клетки могут переключаться назад и вперед в фазу «шмуминг» и «почкование». Более того, когда клеточные экстракты обрабатываются на полуденатурирующем геле, Whi3 оказывается в основном мономерным в необработанных клетках и в основном обнаруживается в больших гомо-мультимерных ансамблях в клетках, обработанных феромоном (Caudron and Barral, 2013).Эти данные указывают на возможную самоконтрольную активность Whi3 в клетках, которые подвергаются воздействию феромона.

Важно отметить, что, несмотря на многие общие черты с известными прионами, способ наследования суперсборок Whi3 отличается от наследования прионов во время деления клеток (Caudron and Barral, 2013; Tuite, 2016). В самом деле, суперсборки Whi3 остаются в материнских клетках при митозе, гарантируя, что состояние памяти стабильно в материнской клетке и не передается потомству.Напротив, прионы заражают почку делящейся дрожжевой клетки. Учитывая его роль в клеточной памяти и его поведение, столь отличное от прионов, Whi3 был назван мнемоном (Whi3 ^mnem).

В то время как прионоподобные домены Whi3 ^mnem важны для выхода из ареста феромонов, мы не знаем механизма стабильности памяти, и если это связано с самотемплитирующей активностью Whi3 ^mnem. Если это так, то неясно, что отличает мнемоны от прионов.В этой работе мы задавались вопросом, требует ли ограничение Whi3 ^mnem материнской клеткой наличия латеральных мембранных диффузионных барьеров. Диффузионные барьеры представляют собой специализированные мембранные домены, которые ограничивают диффузию связанных с мембраной структур через клеточные придатки (Caudron, Barral, 2009; Saarikangas and Barral, 2011), включая первичные реснички (Hu et al., 2010; Kim et al., 2010), дендритные шипы (Ewers et al., 2014) и хвост сперматозоидов (Toure et al., 2011). У почкующихся дрожжей диффузионные барьеры формируются на шейке почек в мембранах ER и ядерной оболочке во время закрытого митоза.Их образование зависит от септинов, семейства цитоскелетных белков, образующих филаменты (Mostowy and Cossart, 2012) на шейке почки (Luedeke et al. , 2005), белков, участвующих в биосинтезе сфинголипидов, включая сфинганин-C4-гидроксилазу Sur2 (Clay et al. , 2014) и белки, участвующие в росте поляризованных клеток, такие как фактор, способствующий нуклеации актина Bud6 (Graziano et al., 2013, 2011) и малая GTPase Bud1 / Rsr1 (Bender and Pringle, 1989). Диффузионные барьеры в дрожжах ограничивают диффузию факторов старения, таких как ядерные поры, неправильно свернутые белки, вызванные возрастом отложения белков и круги ДНК от материнской клетки к почке (Clay et al., 2014; Denoth-Lippuner et al., 2014; Саарикангас и др., 2017; Щепрова и др., 2008).

В свете этих данных мы сначала спросили, вносят ли мембранные диффузионные барьеры вклад в асимметричное поведение Whi3 ^mnem во время деления клеток.

Результаты

Клетки, лишенные диффузионных барьеров, могут приобрести новое рефрактерное состояние к феромонам

Рост дрожжевых колоний контролировали на твердой среде, содержащей низкую концентрацию феромона (10 нМ). Клетки дикого типа росли медленно, в то время как клетки, которые с трудом избегают остановки феромонов ( whi3 -Δ pQ , (Caudron and Barral, 2013)), росли очень плохо (рис. 1A).Оба штамма одинаково хорошо росли на твердой среде, не содержащей феромонов. В среде, содержащей феромон, клетки дикого типа сначала шуршат и возобновляют деление клеток через несколько часов. Их дочерние клетки ведут себя аналогичным образом: сначала шуршат, а затем возобновляют деление клеток. Это замедляет производство дочерних клеток и объясняет, почему клетки дикого типа медленно растут в присутствии феромона. Напротив, мутантные клетки whi3 -Δ pQ продолжают шмыгать в течение очень долгого времени, прежде чем возобновить деление клеток, и многие клетки даже не могут избежать остановки клеточного цикла, вызванной феромонами.Следовательно, мутантные клетки whi3 -Δ pQ растут даже медленнее на планшетах, содержащих феромоны. Чтобы проверить роль диффузионных барьеров в компартментализации рефрактерного состояния к феромонам, мы наблюдали за ростом нескольких мутантных штаммов с нарушенными латеральными диффузионными барьерами. Мы предположили, что если диффузионные барьеры участвуют в ограничении Whi3 ^mnem, эти мутантные штаммы могут по-разному расти на феромоне. Некоторые из мутантов bud1 Δ, bud6 Δ и sur2 Δ росли как дикий тип, а другие намного лучше росли на чашках, содержащих феромоны, даже при высокой концентрации феромона (0.6 мкм, рис. 1А). При такой высокой концентрации феромона клетки не могут избежать ареста феромона, что позволяет предположить, что колонии, растущие в таких условиях, приобрели сильную устойчивость к феромонам. Колонии, растущие на высокой концентрации феромона, сохранили свою устойчивость к феромону после нескольких циклов нанесения штрихов; мы назвали эти изоляты конститутивными беглецами (CE). Чтобы измерить частоту ХЭ, мы высевали по крайней мере 44 независимых клона для каждой мутации, полученной от гетерозиготного диплоида, на богатую среду, которая не содержит феромона или содержит высокую концентрацию феромона (0.6 мкм) (рис. 1A-B). Частота появления CE сильно варьировала между отдельными клонами штаммов дикого типа (между 1,11 × 10 ^-7 и 5,3 × 10 ^-2) со средним значением 1,36 × 10 ^-5 клеток. Скорость фенотипических мутаций для стерильных мутантов измеряли на фоне bar1 Δ при 3,07 × 10 ^-6 / геном / поколение (Lang and Murray, 2008). Мы обнаружили, что он также был вариабельным в из 2 Δ клонов, но медиана была значительно увеличена 3.В 13 раз по сравнению с диким типом (4,26 × 10 ^-5, рис. 1В). В мутантных клетках bud6 Δ и bud1 Δ частоты снова сильно варьировались между клонами, а медианная частота была значительно увеличена в 6,07 раза (8,27 × 10 ⁻⁵) и 3,51 раза (4,78 × 10 ⁻⁵) соответственно. , по сравнению с диким типом. Мы проанализировали эти результаты по-разному, пытаясь стандартизировать дисперсии. Отношения были преобразованы в логит (подробнее см. В материалах и методах).После подбора среднего для каждого штамма дрожжей остатки были явно сильно асимметричными (дополнительный рисунок 1). Этого паттерна можно было бы ожидать, если бы в подмножестве случаев конститутивный фенотип эскейпера имел место на ранней стадии культивирования. Поскольку частота этих исходов не различалась между штаммами, они были исключены из последующего анализа соотношений. На рисунке 1С показано распределение коэффициентов преобразования логита для каждого генотипа. Линейная модель, описывающая средние значения для каждого штамма, показала весьма значимое различие между мутантами дикого типа и мутантами с диффузионным барьером (ANOVA p <2e-16).Эти данные свидетельствуют о том, что увеличение частоты конститутивного бегунка связано с нарушением диффузионного барьера. Более того, тот факт, что мы измерили очень разные частоты, и многие из них намного превышали частоту мутаций, предполагает, что CE индуцируется эпигенетическим механизмом. Поскольку побег из ареста феромона включает Whi3 ^mnem, мы рассмотрели возможность того, что прион является молекулярной основой фенотипа CE.

Дополнительный рисунок 1.

Отклонение остатков от кумулятивного нормального распределения.

Рис. 1. Новый эпигенетический фенотип, конститутивные беглецы.

(A) Серийные разведения 1/10 экспоненциально растущих культур указанных штаммов, нанесенных на твердую среду YPD (слева) или YPD, содержащую α-фактор (10 нМ в середине и 600 нМ справа). На нижней панели показаны три независимых клона bud6 Δ с высокой частотой СЕ. (B) Частота появления CE в указанных генотипах (медиана с 95% доверительным интервалом, n> 37 клонов для каждого, для определения значимости использовался тест множественных сравнений Данна).(C) Распределение коэффициентов преобразования логита (R) для каждого генотипа. (D) Распределение размеров клеток отдельных клонов или изолятов CE указанных штаммов (n> 39 клонов для каждого). (E) Максимальные проекционные изображения sur2 Δ клеток, экспрессирующих Whi3-GFP из 20 изолятов CE и родительского штамма. Изоляты отсортированы по среднему размеру клеток от самого маленького (оранжевая рамка меньше, чем родительский штамм в синей рамке) до самого большого (фиолетовая рамка больше, чем родительский штамм). Шкала шкалы = 5 мкм.

При микроскопическом исследовании CE мы заметили, что некоторые изоляты CE имеют небольшой размер клеток. Поэтому мы измерили размер ячеек нескольких КЭ. В то время как клетки дикого типа и sur2 Δ родительских штаммов имели сопоставимый размер клеток (5,6 мкм, рис. 1D), sur2 Δ ^CE отображали изоляты, которые находились в большом или небольшом диапазоне размеров клеток. Примечательно, что маленькие ячейки размером sur2 Δ ^CE были сопоставимы по размеру с ячейками, удаленными для WHI3 либо в диком типе, либо на фоне sur2 Δ (рис. 1D).Это побудило нас спросить, может ли Whi3 быть прионом в изолятах CE и требуется ли он для образования CE. Классически прионные формы белков теряют функцию нативной конформации. Таким образом, если Whi3 терял свою функцию в форме приона, мы могли бы ожидать, что удаление WHI3 приведет к фенотипу CE. Частота CE у мутантных штаммов whi3 Δ была увеличена по сравнению с штаммами дикого типа (2,45 раза, 3,33 × 10 ⁻⁵) и еще больше увеличилась в штаммах whi3Δ sur2 Δ (4. 58 раз, 6,23 × 10 ⁻⁵). Этот результат указывает на то, что инактивации Whi3 недостаточно, чтобы сделать клетки невосприимчивыми к феромону, хотя она может способствовать этому. Затем мы задались вопросом, требуется ли Whi3 для поддержания фенотипа CE. Мы предположили, что если Whi3 действовал как доминантно-отрицательная форма в этих клетках, удаление WHI3 в sur2 Δ ^CE восстановило бы арест феромонов. Мы специально удалили WHI3 из нескольких sur2 Δ ^CE, которые имели небольшой размер ячейки.Эта делеция не восстанавливала арест феромона (не показано), указывая тем самым, что поддержание фенотипа CE не зависит от Whi3 или что суперсборки Whi3 не являются единственным доминантным фактором, подавляющим ответ феромона в CEs. В целом, мы наблюдаем, что whi3 Δ клеток не все являются CE (большинство клеток арестовываются при воздействии феромона), но удаление WHI3 , по-видимому, способствует образованию CE. Однако Whi3 не требуется для поддержания фенотипа CE. Одна интерпретация этих результатов может заключаться в том, что инактивация WHI3 является одним из этапов превращения клеток в CE, и что каким-то образом диффузионный барьер препятствует переходу в состояние CE.

Чтобы дополнительно проверить, может ли Whi3 находиться в прионной форме в CE, мы выделили 20 CE из родительского штамма sur2 Δ ( sur2 Δ ^CE), экспрессирующего Whi3-GFP из его эндогенного локуса на чашках, содержащих высокая концентрация феромона, и мы наблюдали локализацию Whi3-GFP в этих клетках. Параллельно мы провели измерения размеров клеток этих изолятов. В родительском штамме sur2 Δ Whi3-GFP локализовался довольно диффузно по цитоплазме и в нескольких гранулах ((Caudron, Barral, 2013; Garì et al., 2001) и рисунок 1E). В небольших клетках размером sur2 Δ ^CE Whi3 локализовался диффузно по всей цитоплазме и в более ярких очагах, которые были значительно больше и интенсивнее, чем гранулы, показанные родительским штаммом. Эти яркие очаги встречались гораздо реже в клетках большого размера (рис. 1Е). Примечательно, что эти яркие очаги локализовались как в материнском, так и в почковом отделах делящихся клеток. Это контрастирует с суперсборками Whi3 ^mnem, которые формируются в материнской клетке и обычно не появляются в почках (Caudron and Barral, 2013).Следовательно, в небольших клетках размером sur2 Δ ^CE, Whi3 имеет тенденцию принимать паттерн локализации, напоминающий паттерн локализации классического дрожжевого приона Sup35 в его форме [ PSI +] (Derdowski et al., 2010) . Мы рассмотрели возможность того, что если Whi3 должен находиться в прионной форме для клеток, чтобы стать CE, ему потребуется его прионоподобный домен. Чтобы проверить эту гипотезу, мы оценили частоту CE в мутантных клонах whi3 -Δ pQ . Частота КЭ в этих клетках была значительно ниже, чем в любом другом протестированном нами штамме (6.25 × 10 ^-6, в 2,18 раза меньше, чем у штаммов дикого типа, фиг. 1B, и значительно ниже, чем у штаммов дикого типа, с использованием данных, преобразованных в логит, p <0,0008, фиг. 1C). Удаление BUD1 в штамме whi3 -Δ pQ не привело к значительному увеличению частоты CE (7,45 × 10 ^-6, в 1,192 раза выше, чем в мутантном штамме BUD1 whi3-ΔpQ ) и была ниже, чем в bud1 Δ мутантных клетках.

В целом, мы обнаружили, что нарушение диффузионного барьера увеличивает появление CE, что многие из них имеют небольшой размер клетки и обнаруживают локализацию Whi3 в ярких фокусах.Образование CE увеличивается при удалении WHI3 , но снижается в штаммах, в которых отсутствует прионоподобный домен Whi3. Это указывает на то, что Whi3 действительно находится в прионной форме и что инактивация Whi3 является основным вкладом в образование CE. Однако, поскольку частота CE может быть все еще очень высокой в CE, в котором отсутствует прионоподобный домен Whi3, весьма вероятно, что участвуют другие факторы, возможно новые, но еще не обнаруженные прионы.

Чтобы проверить, действительно ли молекулярные события, приводящие к образованию CE, вызваны прионами, мы проверили, как рост при высокой концентрации феромона сегрегируется при мейозе.Прионы выделяются неменделирующим образом в мейозе и обычно передаются всем четырем мейотическим продуктам. В соответствии с их высокой устойчивостью к обработке феромонами пересечение CE с клетками дикого типа было неэффективным. Тем не менее, мы смогли скрестить некоторые из них и проанализировать полученные тетрады. Мейоз дает 4 споры, 2 из которых — MATα и 2 — MAT a . Таким образом, мы ожидали, что из 4 спор 2 всегда будут расти на альфа-факторе, потому что это MATα .В клетках дикого типа две другие споры не растут на альфа-факторе (0,6 мкМ, дополнительный рисунок 2). Если бы в CE росло более 2 спор, это означало бы, что они унаследовали фенотип CE. Если CE является результатом мутации, которая не связана с локусом MAT , 4/6 тетрад должны иметь 3 споры, растущие на среде, содержащей альфа-фактор, 1/6 должна содержать 4 такие споры и последняя 1/6 из них. тетрады должны содержать только 2 из них (шаблон №1). Если это связано с мутацией, связанной с локусом MAT , следует увеличить долю тетрад с 3 и 4 спорами, растущими на среде, содержащей альфа-фактор (образец № 2).В случае распространения неменделевского фактора через мейоз, все тетрады должны содержать 4 споры, растущие на среде, содержащей альфа-фактор (образец № 3). Наконец, неменделевский фактор, который не проходит мейоз, должен давать тетрады с всегда только 2 спорами, растущими на среде, содержащей альфа-фактор (образец № 4). Мы проанализировали 13 независимых штаммов CE и протестировали рост каждой споры на альфа-фактор (0,6 мкм). Для 4 обратных скрещиваний мы наблюдали тетрады, в которых 2, 3 или 4 споры из 4 росли на α-факторе (дополнительный рисунок 2).Эти обратные скрещивания попадают в паттерн № 1, что свидетельствует о наличии единственной «стерильной» мутации, расщепляющейся независимо от локуса типа спаривания. В 4 других обратных скрещиваниях большинство тетрад содержало 2 споры и несколько 3 спор, растущих на среде, содержащей альфа-фактор, наиболее совместимой с образцом № 4. Кроме того, 5 обратных скрещиваний строго следовали шаблону № 4 (дополнительный рисунок 2). Таким образом, последние 9 обратных скрещиваний, которые несовместимы с одной мутацией, указывают на то, что фенотип CE обусловлен неменделевским фактором, который теряется во время мейоза.Чтобы дополнительно проверить, основаны ли эти признаки CE на прионоподобном механизме, мы проверили, излечились ли они при ингибировании различных эффекторов прионов. Мы выделили 31 sur2 Δ ^CE и трижды пассировали их на YPD, YPD с добавлением гидрохлорида гуанидина (3 мМ) для ингибирования Hsp104 (Ferreira et al., 2001; Tuite et al., 1981) или с добавлением YPD. с радициколом (10 мкМ) для ингибирования Hsp90 (Sharma et al., 1998). Кроме того, мы трансформировали все 31 штамм sur2 Δ ^CE и родительский штамм sur2 Δ доминантно отрицательным аллелем SSA1 ( SSA1 ^DN, (Brown, Lindquist, 2009; Jarosz et al. , 2014)). Во всех случаях после 3 пассажей 31 sur2 Δ ^CE все еще мог расти на YPD, содержащем феромон (0,6 мкм), в то время как родительский штамм sur2 Δ — нет (дополнительный рисунок 3). Однако при наблюдении под микроскопом sur2 Δ ^CE1 мы обнаружили, что многие клетки шумились и делились иным образом. Этого не было для других sur2 Δ ^CE, а также для sur2 Δ ^CE1, пассированных на YPD без лекарств или с GuHCl или радикаколом (дополнительный рисунок 3).Следовательно, фенотип CE не излечивается ни GuHCl, ни радициколом, ни пассажами в течение многих поколений на YPD, но один вариант был частично излечен при ингибировании шаперона Hsp70 Ssa1.

Дополнительная фигура 2. Неменделирующая наследование фенотипа CE во время мейоза.

Схема экспериментального теста (слева) и результаты (справа) 2 бэккроссов родительского штамма sur2 Δ (объединены в одну строку) и 13 скрещенных CE.

Дополнительный рисунок 3. Фенотип CE можно частично вылечить путем ингибирования Ssa1.

Схема экспериментального теста. КЭ выделяли, пересняли 3 раза на YPD, YPD + радицикол (10 мкМ) или YPD + GuHCl (3 мМ) или трансформировали плазмидой, экспрессирующей SSA1 ^DN, и повторно взяли 3 раза на селективной среде. Затем CE снова тестировали на YPD + альфа-фактор (0,6 мкМ). На правых панелях представлены микроскопические изображения родительского штамма sur2 Δ и CE1 и CE2 с коэффициентом YPD + альфа (0,6 мкм) после соответствующих обработок. Стрелки указывают на изменяющиеся клетки в CE1, трансформированные плазмидой, экспрессирующей SSA1 ^DN .Шкала шкалы = 10 мкм.

Рис. 2. Компартментализация эндоплазматического ретикулума латеральным мембранным диффузионным барьером не требуется для индукции и лечения прионов.

(A) Интенсивность флуоресценции, измеренная проточным цитометром [PSI +] WT и [PSI +] sur2 Δ клеток, обработанных или не обработанных 0,1 мМ и 1 мМ GuHCl. (B) Частота появления de novo [PSI +] и (C) процент клеток, излечившихся от [PSI +] с течением времени. Графики A и B отображают среднее значение ± стандартное отклонение.

Рис. 3. Прионные фокусы Sup35 и Whi3 не связаны тесно с мембранами ER, в то время как суперсборки и гранулы Whi3 связаны.

(A) Изображения в одной фокальной плоскости клеток [ PSI +], экспрессирующих Sup35-GFP и Sec61-mCherry. (B) Процент фокусов Sup35, близких к мембранам ER (1180 фокусов проанализировано из 90 клеток трех независимых клонов, представлено среднее значение ± стандартное отклонение). (C) Процент клеток с хотя бы одним фокусом Sup35-GFP вдали от мембран ER (3 клона с более чем 90 клетками в каждом). (D) Изображения в одной фокальной плоскости клеток, экспрессирующих Whi3-mNG и Sec61-mCherry, подвергнутых воздействию феромона в течение 3 часов (вверху слева и посередине слева) и 4 часов (внизу слева), и клеток, подвергнутых воздействию феромона в течение 5 часов и высвобожденных в Свободная от феромонов среда, затем изображение через 6 часов (вверху справа) и через 10 часов. 5 часов (внизу справа) после первоначального воздействия феромона. (E) Процент суперсборок Whi3-mNG, близких к мембранам ER (проанализировано 3 независимых клона,> 300 суперсборок из> 153 клеток, представлены средние значения ± стандартное отклонение). (F) Процент клеток с по меньшей мере одной суперсборкой Whi3-mNG вдали от мембран ER (проанализировано 3 независимых клона,> 300 суперсборок из> 153 клеток, представлено среднее значение ± стандартное отклонение). (G) Изображения в одной фокальной плоскости клеток bud6, Δ (вверху) и клеток bud6, Δ CE (внизу), экспрессирующих Whi3-mNG и Sec61-mCherry.(H) Процент гранул Whi3-mNG ( bud6 Δ) и фокусов ( bud6 Δ CE), локализованных близко к мембранам ER (4 клона или изолята, 527 гранул и 359 очагов в 200 клетках были проанализированы, среднее значение ± стандартное отклонение представлены). Для всех панелей стрелки указывают на фокусы от ER, а стрелки указывают на фокусы рядом с ER. Масштабные линейки = 5 мкм.

В целом, наши данные предполагают, что большая часть CE, образующихся в клетках, лишенных диффузионного барьера на шейке зачатка, происходит из-за неменделирующего фактора и что примерно у половины из них Whi3 способствует их образованию, не ведя себя больше как мнемон, но как прион.

Компартментализация эндоплазматического ретикулума не требуется для индукции и лечения прионов.

Поскольку диффузионные барьеры, по-видимому, играют роль в превращении Whi3 в прион, мы затем спросили, играют ли диффузионные барьеры также роль в индукции и отверждении прионов. Мы специально сосредоточились на наиболее изученном прионе в дрожжах, [ PSI +]. Ранее мы наблюдали, что фарнезилирование ко-шаперона Hsp40 Ydj1 необходимо для снижения преждевременного считывания стоп-кодона в последовательности, кодирующей GFP, в клетках [ PSI +] (Saarikangas et al., 2017). Сила считывания кодонов была связана с потенциальным сбором семян прионов на мембранах ER. Поэтому мы проанализировали считывание стоп-кодона в sur2 Δ клетках. Используя проточную цитометрию, измеряли интенсивность флуоресценции штаммов, которые экспрессируют аллель GFP, содержащий преждевременный стоп-кодон (как у Saarikangas et al., 2017). Удаление SUR2 не изменило интенсивность флуоресценции этих клеток (рис. 2А). Затем мы исследовали роль барьеров боковой диффузии в появлении de novo и отверждении прионов [ PSI +].Не было существенной разницы (p = 0,5204, t-критерий) в частотах появления [ PSI +] у штаммов дикого типа и штаммов sur2 Δ (рис. 2B). Мы также проанализировали динамику отверждения [ PSI +] гуанидин гидрохлоридом (GuHCl, 3 мМ) в клетках дикого типа и sur2 Δ и наблюдали очень похожую динамику отверждения (рис. 2C). Более того, считывание стоп-кодона было сравнительно ниже в клетках дикого типа и sur2 Δ клеток, обработанных 0,1 мМ GuHCl и 1 мМ GuHCl, что демонстрирует, что мы могли количественно измерить силу считывания стоп-кодонов в этих экспериментах (рис. 2А).В целом, эти данные устанавливают, что компартментализация эндомембран с помощью диффузионного барьера на шейке почек не контролирует наследование семян приона Sup35 во время деления клеток.

Суперсборки Whi3 и фокусы Sup35 различаются по их ассоциации с мембранами ER

Поскольку диффузионные барьеры влияют на превращение Whi3 в прион, а не [ PSI +], мы задались вопросом, связаны ли Sup35 и Whi3 с разными расширениями с мембранами ER. Сначала мы проанализировали, как Sup35-GFP в его прионной форме [ PSI +] локализуется относительно ER, визуализированной с использованием субъединицы транслокона Sec61, помеченной mCherry в качестве маркера.Sup35-GFP образовывал несколько небольших фокусов в делящихся клетках, и мы обнаружили, что большинство этих фокусов были пространственно исключены из сигнала Sec61 (рис. 3A и B, 53,1 ± 10,7% фокусов Sup35-GFP находились вдали от сигнала Sec61-mCherry). Мы также заметили, что 100% клеток содержали по крайней мере один фокус от мембран ER (рис. 3C). Это может объяснить, почему отверждение и индукция [ PSI +] не влияет на мутантные клетки sur2 Δ. Затем мы проанализировали локализацию Whi3-mNeonGreen (Whi3-mNG) в его мнемонической форме относительно Sec61-mCherry.В отличие от Sup35-GFP, в клетках, которые подвергались воздействию феромона в течение 3 часов, суперсборки Whi3-mNG в основном были прикреплены к мембранам ER (72,5 ± 4,1% суперсборок, рис. 3D и E). Более того, фракция, относящаяся к системе ER, увеличивалась при более длительном воздействии феромона (82,7 ± 2,1% через 4 часа, 90,0 ± 3,5% через 6 часов и 92,1 ± 3,2% через 10,5 часов, рис. 3D и E). Примечательно, что в то время как 41,2 ± 9,1% клеток имели по крайней мере одну суперсборку Whi3-3GFP вдали от ER после 3 часов обработки феромоном, это значение упало до 27.7 ± 10,7%, 20,0 ± 1,7% и 14,8 ± 4,9% после 4 часов, 6 часов и 10,5 часов лечения феромонами соответственно (Рисунок 3F). Наконец, мы проанализировали локализацию Whi3-mNG относительно мембран ER в маленьком bud6 Δ ^CE. Мы обнаружили, что 60,27% фокусов Whi3-mNG были близки к мембранам ER в клетках bud6 Δ ^CE, в отличие от гранул в клетках bud6 Δ, не относящихся к CE , которые были гораздо сильнее связаны с Мембраны ER (88.17%, рисунок 3G и H).

В целом, мы заключаем, что ассоциация Whi3 ^mnem с мембранами ER становится более тесной со временем после остановки феромона формы побега и что основное различие между суперсборками Whi3 ^mnem и прионной формой Sup35 или фокусами Whi3 в CE. это их другое соединение с сетью мембран ER.

Компартментализация эндоплазматического ретикулума необходима для сохранения Whi3

^mnem и рефрактерного состояния к феромонам в материнской клетке
Установлению и поддержанию рефрактерного состояния к феромонам способствуют конформационные изменения Whi3 и образование суперсборки.Мы задавались вопросом, будут ли материнские клетки с дефектными диффузионными барьерами с большей вероятностью передавать суперсборки Whi3 своим дочерям. Поэтому мы обрабатывали клетки, экспрессирующие WHI3 , слитые с 3 суперфолдинг-зелеными флуоресцентными белками в тандеме (Whi3-3GFP), с феромоном в течение 5 часов, а затем высвобождали их в среде без феромонов в течение 1,5 часов, чтобы позволить материнским клеткам произвести почку. Были получены изображения пар матери и почек и проанализирована локализация Whi3-3GFP. Большинство материнских клеток дикого типа содержали суперсборку Whi3 ^mnem,, и мы наблюдали аналогичные результаты в мутантных клетках bud6Δ, sur2 Δ и bud1 Δ.Однако, в то время как только 24,00 ± 6,22% почек дикого типа имели суперсборку, 62,24 ± 3,85% бутонов Δ, 64,01 ± 3,65% sur2 Δ и 65,26 ± 4,15% бутонов Δ мутантные почки уже имели по крайней мере один (рис. 4A-B). Эти данные согласуются с ролью диффузионных барьеров в удерживании суперсборок Whi3 ^mnem в материнских клетках, которые избежали ареста феромонов.
Рис. 4. Суперсборки Whi3-3GFP образуются в зачатках мутантов со слабым диффузионным барьером.
(A) Изображения клеток, экспрессирующих Whi3-3GFP, в одной фокальной плоскости. Шкала шкалы = 5 мкм. (B) Количественная оценка почек с детектируемой суперсборкой Whi3-3GFP (n = 122 клетки, 148 клеток, 180 клеток и 165 клеток для дикого типа, bud6 Δ, sur2 Δ и bud1 Δ клеток соответственно ) Результаты bud6Δ, sur2 Δ и bud1 Δ значительно отличаются от результатов дикого типа (p <0,0001, односторонний дисперсионный анализ).
Затем мы проверили, требуются ли диффузионные барьеры для сохранения в материнской клетке рефрактерного состояния к феромонам.Мы подвергали гаплоид MAT a феромонам, как и раньше (Caudron and Barral, 2013). Клетки дикого типа первоначально все перемешались после обработки 7 нМ α-фактором, и 90,5% клеток избежали ареста феромона со средним временем 7,35 ± 3,00 часа (рис. 5A-B). Материнские клетки точно сохраняли это рефрактерное состояние, 100% исходных материнских клеток не производили второго шму после того, как избежали ареста феромонов. Ранее мы обнаружили, что примерно 90% дочерних клеток от матерей, которые избежали ареста феромонов, подвергаются шмугу в ответ на феромон после разлуки с матерью в присутствии феромона (Caudron and Barral, 2013).Мы уточнили наш анализ, разделив данные в зависимости от того, были ли дочери первыми или последующими дочерьми после побега из-под ареста феромонов. Мы наблюдали, что почти 50% первых дочерних клеток не реагируют на феромон после рождения, в то время как это число падает до 14,2%, 13,3%, 6,9% и 4,4% для последующих 2 ^nd, 3 ^rd, 4 ^th и 5 ^th дочерей одной материнской клетки (рис. 5C). Чтобы оценить, действительно ли сохранение рефрактерного состояния к феромонам в материнской клетке зависит от наличия диффузионных барьеров на шейке почки, мы протестировали мутантные клетки sur2 Δ, bud6 Δ и bud1 Δ.По причинам, которые остаются неизвестными на данном этапе, клетки с мутацией sur2 Δ ускользнули от ареста феромона несколько раньше, чем клетки дикого типа (5,9 ± 2,0 часа, рис. 5 A-B). После того, как эти материнские клетки ускользнули, они поддерживали состояние рефрактерности к феромонам так же эффективно, как и клетки дикого типа, и больше не дрожали. Однако доля дочерних клеток sur2 Δ, которые не смогли образоваться после отделения от своей материнской клетки, увеличилась в 1,51, 2,83 и 1,66 раза для 1 ^-й, 2 ^-й и 3 ^-й дочерей соответственно.(Рисунок 5C). bud6 Δ мутантные клетки ответили на феромон так же, как и клетки дикого типа, и избежали ареста феромона немного позже, чем они (рис. 5A-B). Что касается дочерних клеток sur2 Δ, многие дочерние клетки bud6 Δ не смогли «шмуроваться» при отделении от их материнской клетки (рис. 5C). Мы получили аналогичные результаты с bud1 Δ мутантных клеток (рис. 5A-C). Эти результаты показывают, что диффузионный барьер ER усиливает ограничение рефрактерного к феромонам состояния материнской клеткой.
Рис. 5. Диффузионный барьер ER предотвращает наследование дочерними клетками рефрактерного состояния к феромонам.
(A) Побег дикого типа, клетки bud6 Δ, sur2 Δ и bud1 Δ, подвергшиеся воздействию 7 нМ феромона. (B) Процент начальных клеток, все еще двигающихся по прошествии указанного времени (n> 154 клеток). (C) Процент дочерних клеток, отрастающих сразу после отделения от материнской клетки (n> 128 клеток, n> 121 клеток, n> 111 клеток, n> 88 клеток и n> 59 клеток для 1 ^st, 2 ^nd, 3 ^-й, 4-й ^-й и 5-й ^-й дочь соответственно).(D) Время ускользания дочерних клеток, которые сбились ( из 2 Δ значительно отличается от дикого типа, p <0,0001, односторонний дисперсионный анализ, все другие сравнения существенно не отличаются, n = 366 клеток, 81 клетка, 416 клеток и 193 клетки для дикого типа, bud6 Δ, sur2 Δ и bud1 Δ клеток соответственно).
Затем мы задались вопросом, влияют ли мутации bud6Δ, sur2 Δ или bud1 Δ на время выхода в дочерних клетках, которые делают shmoo в ответ на феромон.Мы предположили, что эти дочерние клетки могут ускользать быстрее, если они унаследуют факторы, способствующие побегу из материнской клетки. Однако мы не обнаружили какого-либо общего влияния на время выхода дочерних клеток у этих мутантов (рис. 5D). Мы по-прежнему наблюдали, что sur2 Δ дочерних клеток ускользали быстрее, чем клетки дикого типа, bud6 Δ и bud1 Δ клеток, как и их матери.
В целом, мы заключаем, что диффузионный барьер в кортикальном ER помогает ограничить состояние рефрактерности к феромонам материнской клеткой.Важно отметить, что в клетках, лишенных функционального барьера, наследование рефрактерного состояния дочерними клетками не происходит за счет потери материнской клеткой рефрактерного состояния к феромонам. Действительно, мутантные материнские клетки bud6 Δ, sur2 Δ и bud1 Δ сохраняли это состояние так же эффективно, как и клетки дикого типа. Вместе эти результаты указывают на то, что диффузионный барьер ER ограничивает состояние рефрактерности к феромонам материнской клеткой, предотвращая образование суперкомплексов в дочерних клетках.Поразительно, что эта роль барьера наиболее очевидна в первые несколько циклов после выхода феромона материнской клеткой и гораздо меньше в дальнейшем.
Прионоподобный домен Whi3 необходим для симметричного наследования рефрактерного состояния в клетках с нарушенным диффузионным барьером
Далее мы пришли к выводу, что если наследование рефрактерного состояния к феромонам дочерними клетками зависит от суперсборок Whi3 ^mnem , то предотвращение превращения Whi3 в его мнемонную форму может приводить к меньшему количеству дочерних клеток, наследующих феромонорефрактерное состояние при дефектах диффузионного барьера.Чтобы проверить эту идею, мы подвергли воздействию феромона whi3-ΔpQ, whi3-ΔpQ bud6, Δ и whi3-ΔpQ bud1 Δ мутантных клеток и проанализировали, шумили ли дочери клеток, избежавших ареста феромона, шевелясь или отпочковались после рождения. Большинство дочерних клеток whi3 -Δ pQ сместились при рождении (фиг. 6), и это существенно не отличалось в клетках whi3Δ-pQ bud6 Δ и whi3Δ-pQ bud1 Δ. Взятые вместе, эти данные подтверждают, что Q-богатый прионоподобный домен Whi3 участвует в наследовании рефрактерного состояния к феромонам дочерними клетками, у которых отсутствует диффузионный барьер.
Рис. 6. Домен polyQ Whi3 необходим для наследования рефрактерного состояния к феромонам дочерними клетками с нарушенным диффузионным барьером.
Процент дочерних клеток указанных генотипов, отрастающих сразу после отделения от материнской клетки. Представлено среднее ± стандартное отклонение.
Обсуждение
В этой работе мы исследовали механизмы, которые позволяют устойчивому к феромонам состоянию быть стабильным в материнских клетках на протяжении многих делений, предотвращая его передачу дочерним клеткам.Наши данные подтверждают модель, в которой Whi3 принимает самоконтрольную конформацию, которая зависит от его прионоподобных доменов при длительном воздействии феромонов. Самостоятельно создающий шаблон Whi3 ^mnem ограничен диффузионными барьерами к материнской клетке, и когда это ограничение потеряно, Whi3 ^mnem действительно распространяется на дочерние клетки. В значительной части случаев он даже начинает размножаться митотически стабильным образом, подобно прионам.
В самом деле, мы обнаружили, что дрожжевые клетки могут приобретать митотически стабильное состояние, устойчивое к феромонам, и клетки, несущие это состояние, были названы конститутивными беглецами.Некоторые из этих CE имеют небольшие размеры клеток, фенокопируя потерю функции Whi3. В этих небольших клетках CE Whi3 образует фокусы, что является признаком локализации прионов в дрожжах. Более того, для индукции CE требуются прионоподобные домены Whi3. Эти данные указывают на то, что Whi3 находится в доминантной неактивной, самозатрачивающейся форме приона в этих вариантах CE. Тот факт, что удаление WHI3 увеличивает частоту CE, указывает на то, что важным этапом перехода в состояние CE является инактивация Whi3 через его преобразование в прионную форму.Интересно, что результат, что whi3 Δ мутантные клетки все еще способны приобретать состояние CE, указывает на существование дополнительных прионоподобных факторов в клетках CE. Таким образом, CE является многообещающим случаем для идентификации новых прионов в дрожжах.
Во время бегства от ареста феромона в клетках с дефицитом диффузионного барьера для наследования феромонорефрактерного состояния дочерними клетками необходимы прионоподобные домены Whi3, что также указывает на то, что Whi3 ^mnem находится в самозатратной конформации.В клетках с дефицитом диффузионного барьера состояние рефрактерности к феромонам стабильно в материнских клетках, указывая тем самым, что небольшие сборки диффундируют в дочерние клетки и засевают там рефрактерное состояние к феромонам. Однако в клетках с дефектным диффузионным барьером только первые две-три дочерние клетки могут эффективно наследовать состояние рефрактерности к феромонам. В следующих дочерних клетках это происходит гораздо реже. Мы предполагаем, что за время двух-трех клеточных циклов суперкомплексы созревают до более твердой формы, которая больше не генерирует семена и не улавливает их эффективно.Эти данные обеспечивают экспериментальную поддержку механизма поддержки памяти с помощью механизма самошаблона. Это особенно интересный механизм, потому что он может установить стабильную память, которая длится дольше, чем оборот самого белка Whi3, и не позволяет вновь синтезированному Whi3 восстановить функцию WHI3 .
Все эти данные свидетельствуют о том, что Whi3 может образовывать несколько типов сборок, будь то в форме мнемона или приона. Поскольку CE может иметь клетки разного размера, возможно, что Whi3 может принимать несколько типов прионных форм, что напоминает различные штаммы, которые могут образовывать прионы (Derkatch et al., 1996). Также может быть, что мнемоническая и прионная формы на самом деле одни и те же, и что теряется только механизм удержания в материнской клетке. CE часто встречается в клетках с дефектными диффузионными барьерами. Поскольку bud1 Δ клеток демонстрируют эту особенность, наши результаты указывают на диффузионный барьер ER, играющий важную роль в предотвращении индукции CE. Действительно, делеция BUD1 влияет только на диффузионный барьер ER, в то время как ядерный диффузионный барьер остается неизменным (Clay et al., 2014). Тем не менее, эти наблюдения вызывают вопрос о том, как диффузионные барьеры могут предотвратить индукцию CE?
Мы обнаружили, что на индукцию и отверждение прионов [ PSI +] не влияет наличие диффузионных барьеров. Напротив, мы наблюдали, что суперсборки Whi3 ^mnem и состояние рефрактерности к феромонам, которое они кодируют, не ограничиваются так же эффективно материнской клеткой в клетках с дефектным диффузионным барьером, чем в клетках дикого типа. Таким образом, мы предполагаем, что одна из функций диффузионных барьеров — удерживать суперсборки Whi3 ^mnem в отсеке, где они формируются.Хотя известно, что Whi3 не является липидированным или не имеет трансмембранных доменов, Whi3 ассоциирует с мембранами ER (Vergés et al., 2007). Независимо от того, как это происходит, такая ассоциация д. Позволять диффузионному барьеру ограничивать диффузию семян Whi3 вдоль мембран ER через шейку почек. Что еще более важно, мы обнаружили, что суперсборки Whi3 ^mnem тесно колокализуются с мембранами ER во время длительного феромонного ответа. Поэтому в будущем будет важно понять, как Whi3 закрепляется на мембранах ER, чтобы иметь возможность более тщательно протестировать нашу модель удерживания посредством диффузионного барьера ER.В целом особенностью мнемонов может быть их тесная связь с мембранами ER, позволяющая ограничиваться одним клеточным компартментом. Это разительно отличается от приона Sup35, большая часть которого обнаруживается в очагах, удаленных от мембран ER. В этом случае наличие диффузионных барьеров в мембране ЭР не влияет на обмен семенами через шейку почек. Как только Sup35 приобретает свою прионную форму в клетке, он может свободно вторгаться в почку и поддерживать связанные с ним фенотипы в потомстве и, следовательно, образовывать всю колонию.Мы наблюдали аналогичную картину локализации, соответствующую мембранам ER для фокусов Whi3 в клетках CE. Это наводит на мысль, что форма приона Whi3 может отличаться от формы мнемона, по крайней мере частично, из-за статуса их мембранной ассоциации. Необходимо выяснить, происходит ли отсоединение Whi3 в CE от мембран ER из конформационных изменений, ингибирующих взаимодействие Whi3 с его якорем ER, или из-за изменения регуляции этого взаимодействия.
В целом мы предполагаем, что отсутствие барьера позволяет отобрать стабильные прионные штаммы Whi3 и, возможно, другие прионы.Появление этих прионов не могло бы произойти, если бы они были ограничены.
Многие белки могут принимать прионоподобное поведение во всех сферах жизни. Недавние попытки охарактеризовать эти белки показали, что это, вероятно, более распространено, чем ожидалось. Мы представили здесь, что дрожжевые клетки развили механизмы, чтобы ограничивать и, таким образом, контролировать некоторые из них. Мы предполагаем, что это не ограничивается бутонизированными дрожжами. Примером может служить белок CPEB, который принимает прионоподобную конформацию на активированных дендритных шипах (Khan et al., 2015; Si et al., 2010). Интересно, что дендритные шипы представляют собой сильно расчлененные клеточные придатки и, подобно делящимся дрожжевым клеткам, их компартментализация и морфология контролируются белками септина на шейке позвоночника (Ewers et al., 2014). Следовательно, возможно, что преобразование прионов CPEB ограничено активированным дендритным шипом из-за его компартментализации с помощью диффузионных барьеров, которые могут предотвратить распространение прионной формы на соседние неактивированные шипы.Еще одно соображение может заключаться в том, что ограничение прионоподобных элементов, таких как мнемоны, может предотвратить их превращение в инфекционные прионные частицы. В этом случае мы могли бы предположить, что патологии, связанные с прионоподобным поведением, могут возникнуть, когда ограничение этих элементов потеряно.
Материал и методы
Штаммы
Штаммы, использованные для выхода из ареста феромона, были производными s288c BY4743 дикого типа (yYB4508: MAT a , his3Δ1 leu2Δ0, ura3Δ0 met15Δ09 lysan TRP) с делециями, полученными по (Janke et al., 2004) (yYB4507: sur2 :: NAT ; yYB4510: bud6 :: NAT ; yYB4511: bud1 :: NAT ). Штаммы, используемые для локализации Whi3, были производными дикого типа (yYB6520: MAT a ura3Δ0, hisΔ13, leu2Δ0, TRP1, LYS2, ADE2, met15Δ0, WHI3-3GFP: kanMX45, bar1 :: HISC3 ). для штаммов bud6 Δ (yYB10190), в yYB4507 для sur2 Δ (yYB10192) или yYB4511 для bud1 Δ (yYB10187). Штаммы для совместной локализации Whi3-3GFP и Sec61-mCherry были получены с помощью ПЦР-мечения Sec61 в yYB6520 (yFC203: MAT a ura3Δ0, hisΔ13, leu2Δ0, TRP1, LYS2, ADE2, met315-3GFP, WHI315-3GFP, : kanMX, bar1 :: HIS3, Sec61-mCherry: kanMX) .Штаммы W303, используемые для тестирования индукции [PSI +] и отверждения, были получены от Джонатана Вейссмана, yYB8040 ( MATα , leu2-3, -112; his3-11, -15; trp1-1; ura3-1; ade1-14 ; can1-100 , [ RNQ +], [ PSI +]). Штамм sur2 Δ был получен путем делеции SUR2 согласно Janke et al. (Janke et al., 2004) (yYB8435 MATα , leu2-3, -112; his3-11, -15; trp1-1; ura3-1; ade1-14; can1-100, sur2 :: HIS3 , [ RNQ +], [ PSI +]).Локализация Whi3 в sur2 Δ ^CE была проанализирована в штамме yYB5147 ( his3Δ1, leu2Δ0, met15Δ0, ura3Δ0, LYS2, bar1 :: kanMX, sur2 :: NatMX, Whi3-GFP6: HIS4: ). Для анализа совместной локализации Sup35-GFP и Sec61-mCherry мы использовали штамм yFC202 ( MAT a / alpha SUP35 / SUP35-GFP: HIS3; leu2-3, -112 / leu2Δ0; his3-11, -15 / his3Δ1; trp1-1 / TRP1; ura3-1 / ura3Δ0; ade1-4 / ADE1; can1-100 / CAN1, MET15 / met15Δ0, SEC61 / Sec61: mCherry: URA3 [ RNQ +], [ PSI +]).Для считывания стоп-кодонов мы использовали дикий тип ( MAT alpha , leu2-3-112, his3-11, -15, trp1-1, ura3-1, ade1-4, can1-100 , [ RNQ +], [ PSI +], pRS304 pGPD GST-UGA-GFP-pest: URA3 ) или sur2 Δ штамм ( MAT альфа , leu2-3-112, his3-11 , -15, trp1-1, ura3-1, ade1-4, can1-100 , [ RNQ +], [ PSI +], pRS304 pGPD GST-UGA-GFP-pest: URA3 sur2 :: KanMX ).
Микроскопия
Все изображения были получены либо на Personal Deltavision (Applied Precision), оснащенном камерой CCD HQ2 (Roper) и ксеноновыми лампами 250 Вт, управляемыми Softworx, либо Deltavision Elite (GE Healthcare), оснащенными камерой sCMOS и твердотельным датчиком. государственные светодиоды, контролируемые Softworx.Фильтры флуоресцеина изотиоцианата и тетраметилродамина изотиоцианата использовали для визуализации флуоресценции GFP и mCherry. Деконволюцию выполняли с помощью Softworx.
Microfluidics
Эксперименты проводились с микрофлюидной перфузионной платформой ONIX с микрожидкостными пластинами Y04C (CellAsic). Среда представляла собой дрожжевой экстракт пептон-декстрозы (YPD) с добавлением 20 мг / мл казеина и содержащим 7 нМ α-фактора (рис. 2 и 3E) или 6 нМ α-фактора (рис. 3C-D).
Количественная оценка Shmooing
Shmooing или состояние бутонизации проверяли визуально.Во время микрофлюидных экспериментов изображения снимались каждые 15 мин. Клетки без ссадин, показавшие поляризованный рост, считали шмумингом. Клетки без ссадин, претерпевающие изотропный рост, считали клетками G1. Обычно эти клетки вскоре начинали формировать почку. Образцы состояли из трех независимых клонов.
Количественное определение суперкомплексов Whi3-3GFP
Клетки выращивали в YPD с добавлением 20 мг / мл казеина и содержащим 7 нМ α-фактора, и их кратковременно центрифугировали при 600 g, ресуспендировали в среде SD-TRP, помещали между слайдом и покровное стекло, и изображение сразу же.После деконволюции изображения анализировали с помощью программного обеспечения Softworx, как и раньше [27]. Для каждого штамма наблюдали по три клона с общим n> 122 клеток.
Количественная оценка [PSI +]
de novo внешнего вида
клеток [PSI +] [PIN +] дикого типа и sur2 Δ клеток сначала вылечивали с помощью 3 пассажей на агаровой среде YPD, содержащей 3 мМ GuHCl. Одиночные красные колонии [psi-] [pin-] оценивались на предмет их способности снова стать белыми. Клетки высевали на SC-Ade и YPD и измеряли частоту появления белых колоний.Белые колонии тестировали на их способность снова становиться красными после пассажей на YPD, содержащем 3 мМ GuHCl.
Количественная оценка отверждения [PSI +] во время обработки GuHCl
Клетки выращивали в течение ночи в жидком YPD и разбавляли утром до OD _{600 нм} = 0,2 в YPD с 3 мМ GuHCl. Образцы отбирали каждые 30 минут и помещали на синтетическую среду с низкой концентрацией аденина. Жидкие культуры поддерживали в экспоненциальной фазе во время эксперимента. Колониям давали возможность расти при 30 ° C в течение нескольких дней, и через 2 дня инкубации при 4 ° C оценивали соотношение белых и красных колоний, чтобы дать возможность хорошо развиться красному цвету.Первоначально мы определили, что отверждение начинается после 12 часов обработки GuHCl как для штаммов дикого типа, так и для штаммов sur2 Δ.
Количественная оценка считывания стоп-кодона с помощью проточной цитометрии
Для экспериментов по считыванию стоп-кодона, клетки дикого типа [ PSI +] и sur2 Δ [ PSI +], экспрессирующие хромосомно интегрированный pGPD GST- UGA-GFP-вредители выращивали в течение 5 часов без GuHCl или с 0,1 мМ или 1 мМ GuHCl. Интенсивность флуоресценции GFP измеряли с помощью проточного цитометра BD Accuri C6 с использованием лазера 488 нм и фильтра BD 533/30 для 100 000 клеток / клон (по 3 клона каждый).Данные анализировали с помощью программного обеспечения FlowJo (FlowJo LLC).
Количественная оценка частот CE
Диплоидные штаммы, гетерозиготные по различным мутациям, были спорулированы (например, SUR2 / sur2 Δ или WHI3 / whi3 Δ). MAT a Отбирали спор и определяли их генотипы путем роста на селекционной среде. Штаммы выращивали в YPD до середины логарифмической фазы и наносили на твердый YPD и твердый YPD, содержащий 0,6 мкМ α-фактор. Колонии подсчитывали через 2-3 дня роста при 30 ° C.
Анализ проводился на основе оценок относительной плотности дрожжей, полученных из подсчета колоний (C) при соответствующем разведении (D). Относительная плотность для каждого клона была получена в присутствии феромона (p) и соответствующего контроля (c), поэтому относительная производительность определяется соотношением:
Отношение было преобразовано логитом в попытке стандартизировать дисперсию. После подбора среднего для каждого штамма дрожжей остатки были явно сильно асимметричными (дополнительный рисунок 1 показывает отклонение от кумулятивного нормального распределения).Этого паттерна можно было бы ожидать, если бы в подмножестве случаев конститутивный фенотип эскейпера имел место на ранней стадии культивирования. Отклонение от кумулятивного нормального распределения остатков является резким для стандартизованных остатков больше единицы (показано вертикальной линией). Поскольку частота этих исходов не различалась между штаммами (χ ² = 3,02, P = 0,88), они были исключены из последующего анализа соотношений.
На рис. 1С показано распределение коэффициентов логит-трансформации (R) для каждого генотипа.Линейная модель, описывающая средние значения каждого штамма, показала очень значимую разницу между тремя штаммами, для которых априори ожидалось более сильное действие феромона ( whi3 -Δ pQ , bud1Δ whi3-ΔpQ и дикий тип) и остаток (ANOVA P <2e-16). Соответствующие значения для этих двух категорий показаны красной линией. Не было значительных различий между средними значениями для этой оставшейся группы (P = 0,41), тогда как между тремя значительными различиями (P <0.0007) - в частности, whi3 -Δ pQ был заметно ниже, чем у дикого типа (P <0,0008). Пакет R для этого анализа доступен в дополнительном материале.
Измерения размеров клеток
Размеры клеток определяли с использованием счетчика клеток CASY, модель TTC (система Schärfe). Штаммы выращивали до ранней логарифмической фазы, разбавляли в CASYton (электролитный буфер от системы Schärfe) и обрабатывали в соответствии с инструкциями производителя.
Количественная оценка фокусов Sup35 и совместной локализации суперсборок / фокусов / гранул Whi3 с мембранами ER
Для локализации Whi3-3GFP клетки выращивали в YPD, дополненном 20 мг / мл казеина и содержащим 7 нМ α-фактор, и кратковременно выращивали центрифугировали при 600 g, ресуспендировали в среде SD-TRP, помещали на подушечку с агаром SC-TRP, покрытую покровным стеклом, и немедленно отображали.Изображения были проанализированы после деконволюции с помощью программного обеспечения Softworx. Для каждого штамма наблюдали три клона с общим n = 194 клеток, 250 клеток, 170 клеток и 153 клеток в течение 3 часов, 4 часов, 6 часов и 10,5 часов. Всего было проанализировано 333, 402, 393 и 317 суперсборок через 3 часа, 4 часа, 6 часов и 10,5 часов. Обратите внимание, что мы проанализировали только суперсборки, которые находились в 5 лучших фокальных плоскостях, поскольку совместную локализацию было трудно оценить в верхней и нижней фокальных плоскостях, и мы подсчитали только фокусы Sup35-GFP и суперсборки Whi3-3GFP в материнских клетках. .
Благодарности
Мы хотели бы поблагодарить Робина Хэннея за его помощь в создании некоторых штаммов. Эта работа была поддержана грантом проекта Совета по исследованиям биотехнологии и биологических наук (BB / S001204 / 1) для FC, QMUL для FC и YL, Академии Финляндии (317038) и Фонда Сигрид Юселиус для JS и Европейского исследовательского совета (BarrAge). 250278) и ETH Zurich (в JS, FC и YB).
Мнемоника и советы по оценке состояния здоровья медсестер
Говорят, что лучшие медсестры превосходно получают оценку, и это правда! Если медсестры будут смотреть на сестринский процесс, оценка будет первым и ключевым шагом.
Сбор информации о клиенте поможет понять, какую помощь вы можете оказать и во что вы можете вмешаться. Если у вас слабый фундамент в оценке, остальная часть процесса последует.
Но из-за множества способов оценки пациента оценка превратилась в сложный процесс. Чтобы быть более систематичным, вот мнемоника и советы по оценке состояния здоровья медсестер, которые вы можете использовать для точной и быстрой оценки множества пациентов с различными состояниями и в различных ситуациях.
1. Оценка уровня сознания: «АВПУ»
Шкала AVPU — это система, в которой вы можете измерить и записать реакцию пациента, чтобы указать уровень его сознания. Это упрощенная шкала комы Глазго, которая оценивает реакцию пациента по трем параметрам: глаза, голос и моторика. Шкалу AVPU следует оценивать по этим трем идентифицируемым признакам, ища лучший ответ для каждого. У него есть четыре возможных результата для записи, и медсестра всегда должна работать от лучшего (A) до худшего (U), чтобы избежать ненужных тестов на пациентах, которые находятся в сознании.С другой стороны, его не следует использовать для длительного наблюдения за неврологическим статусом.
A: Оповещение
V: Ответ на вербальные стимулы
P: Ответ на боль
U: Не отвечает
2. Оценка из анамнеза: «ОБРАЗЕЦ»
Как правило, не следует собирать подробный анамнез до тех пор, пока не будут выявлены опасные для жизни травмы и не будет начато лечение.Вторичный опрос — это, по сути, полная оценка прогресса, показателей жизнедеятельности и т. Д. SAMPLE часто используется в качестве мнемоники для запоминания ключевых элементов истории болезни пациента.
S: Симптомы
A: Аллергия
M: Лекарства
P: История болезни
L: Последний прием внутрь
E: События, приведшие к болезни или травме
3.Экспресс-оценка травм: «DCAP-BTLS»
DCAP-BTLS — это мнемоника для запоминания конкретных повреждений мягких тканей, которую необходимо искать во время оценки человека после травмы.
D: Деформации
Пороки развития или деформации тела.
C: Ушибы
Повреждение тканей с изменением цвета кожи без повреждения кожи; также называется синяком.
A: Ссадины
Ссадины, вызванные трением острым предметом, в результате чего поверхность очищается от кожи.
P: Проколы или проникновения
Рана с относительно небольшим отверстием по сравнению с глубиной; производится узким заостренным предметом.
B: Ожоги
Ожоги — это травмы тканей, вызванные теплом, трением, электричеством, радиацией или химическими веществами.
T: Нежность
Нежность или болезненность на ощупь.
L: Разрывы
Разорванная или зазубренная рана, вызванная тупой травмой; неправильно используется при описании разреза.
S: Отек
Признак воспаления; вызвано экссудацией жидкости из капиллярных сосудов в ткани.
4. Скрининг на алкоголизм: «КЕЙДЖ» Анкета
CAGE — широко используемый и широко проверенный метод скрининга на алкоголизм. Два ответа «да» указывают на то, что возможность алкоголизма требует дальнейшего изучения. Безусловно, самый важный вопрос в анкете CAGE — это употребление напитка в качестве средства, открывающего глаза, настолько, что некоторые клиницисты используют «да» только на этот вопрос в качестве положительного ответа на анкету; это связано с тем, что употребление алкогольного напитка в качестве средства для открывания глаз ассоциируется с зависимостью, поскольку пациент переживает возможную абстиненцию по утрам, отсюда и потребность в напитке в качестве средства, открывающего глаза.
C: Вы когда-нибудь думали, что вам нужно СОКРАТИТЬ в употреблении алкоголя?
A: Раздражали ли вы когда-нибудь критикой вашего пьянства?
G: Вы когда-нибудь чувствовали себя ВИННЫМ из-за того, что пьете?
E: Вы когда-нибудь пробовали утренний EYE OPENER , чтобы избавиться от похмелья?
5. Оценка неотложной травмы: «ABCDEFGHI»
Мнемоника ABCDEFGHI используется для быстрой оценки пациентов с травмами.Это особенно полезно в экстренных случаях. Целью первичной оценки является сохранение жизни жертвы и принятие необходимых мер. После устранения опасного для жизни состояния жертвы спасатель должен приступить к вторичной оценке.
A: Дыхательные пути
Держите дыхательные пути открытыми, чтобы тело могло впитывать кислород и выводить углекислый газ. Используйте технику подъема подбородка с наклоном головы, чтобы открыть дыхательные пути. Проверьте или удалите препятствия. Закупорка дыхательных путей может привести к остановке дыхания или сердца.
B: Дыхание
Когда дыхательные пути открыты, проверьте нормальное дыхание, воспользуйтесь техниками «смотреть, слушать и чувствовать».
Посмотрите на грудь и понаблюдайте за подъемом и опусканием для нормального дыхания. Прислушайтесь к движению воздуха. Почувствуйте, как воздух выходит через рот или нос. Если дыхания нет или нет нормального дыхания, СЛР необходимо начать с 2 вдохов.
C: Circulation
Богатая кислородом кровь не может циркулировать без дыхания. Следовательно, нет необходимости проверять пульс, чтобы определить, нужна ли СЛР; начать немедленно, если дыхание не обнаружено.
D: инвалидность
Проверьте неврологический статус пациента и убедитесь в отсутствии явных деформаций или инвалидности.
E: Обнаружить и исследовать
Снимите одежду, чтобы должным образом осмотреть пациента; обязательно держите пациента в тепле.
F: Полный набор показателей жизнедеятельности
Обратите внимание на любые изменения следующих признаков: пульс (сонный, плечевой, лучевой), зрачки, дыхание, уровень сознания, артериальное давление, цвет и температура кожи.
G: меры по обеспечению комфорта
Продолжайте отдыхать и успокаивать.Примите меры по обеспечению комфорта и предотвратите дальнейшие травмы.
H: Анамнез и комплексная оценка
Используйте мнемонический ОБРАЗЕЦ, чтобы получить историю здоровья и затем провести всестороннюю оценку.
I: Осмотр задней поверхности
Осмотр на предмет ран, деформаций, обесцвечивания и т. Д.
6. Семь предупреждающих знаков рака: «ВНИМАНИЕ»
Раннее выявление — ключ к лечению рака. Мнемоника ВНИМАНИЕ используется Американским онкологическим обществом для обнаружения и распознавания ранних предупреждающих признаков рака.Хотя один из этих признаков не обязательно означает, что кто-то болен раком.
C: Изменение привычек кишечника или мочевого пузыря
A: Боль в горле, которая не заживает
U: необычное кровотечение или выделения
T: Утолщение или уплотнение в груди или другом месте
I: Несварение или дисфагия
O: Явное изменение бородавки или родинки
N: тянущий кашель или охриплость
7. Оценка по семейному анамнезу: «BALD CHASM»
Семейный анамнез играет решающую роль в оценке риска наследственных заболеваний, хронических заболеваний и заболеваний, передающихся генетически.Обведите контуром или схемой возраст и состояние здоровья или возраст и причину смерти братьев и сестер, родителей, бабушек и дедушек. Документируйте наличие или отсутствие конкретных болезней в семье. Используйте мнемонику «BALD CHASM», чтобы вспомнить болезни, которые необходимо исследовать.
B: Кровяное давление
Афроамериканцы имеют более высокий риск высокого кровяного давления. Неправильный выбор образа жизни и неправильное питание, которые передаются по наследству в семье, также могут представлять опасность.
A: Артрит
Некоторые типы артритов передаются по наследству.Гены могут быть фактором, который может сделать человека восприимчивым к факторам окружающей среды, которые могут вызвать артрит.
L: Заболевания легких
Муковисцидоз — распространенное наследственное заболевание, поражающее в основном легкие. Проявляется скоплением густой липкой слизи, частыми инфекциями и кашлем.
D: Диабет
Семейный диабет 2 типа в анамнезе подвергает пациента повышенному риску его развития.
C: Cancers
Определенные виды рака, такие как рак груди и рак толстой кишки, чаще появляются в некоторых семьях.
H: Сердечные заболевания
Гены могут передавать риск сердечно-сосудистых заболеваний, а также могут нести ответственность за передачу других состояний, таких как высокое кровяное давление или высокий уровень холестерина.
A: Алкоголизм
Определенные генетические факторы влияют на алкоголизм. Исследования показывают, что у детей алкоголиков примерно в четыре раза чаще, чем у населения в целом, возникают проблемы с алкоголем.
S: Инсульт
Риск инсульта выше, если этот инсульт произошел от кого-то из родственников пациента.Некоторые инсульты могут быть симптомами генетических заболеваний, таких как КАДАСИЛ.
M: Психические расстройства (депрессия, биполярное расстройство, шизофрения и т. Д.)
Некоторые психические заболевания могут передаваться по наследству, хотя они могут быть вызваны целым рядом факторов, а не только генами.
8. Оценка груди: «LMNOP»
Образования молочной железы сильно различаются по этиологии: от фиброаденом до кист, абсцессов, мастита и рака груди. Все новообразования в груди требуют тщательного обследования и проведения окончательных диагностических мероприятий.
L: Шишка
Осмотрите и пальпируйте грудь на наличие шишек, новообразований
M: Изменения молочных желез
Осмотрите и пальпируйте на предмет ямочки, болезненности, аномальных контуров
N: Изменения сосков
Осмотрите и пальпируйте на предмет втягивания соска, повреждений и выделений.
O: Другие симптомы
Проверьте размер, симметрию, внешний вид кожи, направление наложения, высыпания и изъязвления
P: Факторы риска пациента
Проведите собеседование с пациентом на предмет предрасполагающих факторов, получите семейный анамнез или воспользуйтесь инструментом оценки риска рака груди.
9. Аббревиатура глаз
Сокращения, обозначающие глаза, часто сбивают с толку. OU, что означает латинский термин Oculus Uterque, означает оба глаза; OD для Oculus Dexter относится к правому глазу и OS для Oculus Sinister для левого глаза. Помните приведенную выше мнемонику, чтобы понять смысл этих сокращений.
Y OU смотреть с ОБЕИХ глаз.
Доза RIGHT не будет OD [передозировка].
Единственное, что LEFT — это OS .
10. Признаки VS Симптомы
Признаки обычно отличаются от симптомов, и оба они являются ненормальными и имеют отношение к потенциальному заболеванию. Признак является объективным и обнаруживается медицинским работником во время обследования, тогда как симптом субъективен, наблюдается и ощущается пациентом и не может быть измерен напрямую.
СИГНАЛ: что-то, что я могу обнаружить, даже если пациент без сознания.
sYMptom — это то, о чем знает только hYM.
11. Оценка боли: «OPQRSTU»
Оценка боли является важной частью роли медсестер, и поэтому использование процесса решения проблем становится частью уравнения. Боль — это неприятное сенсорное и эмоциональное переживание, связанное с действительным или потенциальным повреждением тканей или описываемое как повреждение. Боль субъективна, поэтому необходима тщательная оценка.
O: Начало
Когда это началось? Как долго это длится (продолжительность)? Как часто это происходит (время)? Что вы делали, когда началась боль?
P: провоцирующие или сдерживающие факторы
Что это вызывает? Что делает его лучше? Что еще хуже?
Q: Качество
На что это похоже? Можете ли вы описать это (пульсирующая, колющая, тупая и т. Д.))?
R: Регион и излучение
Боль иррадиирует? Где он распространяется? Укажите, где болит больше всего. Куда уходит ваша боль?
S: Степень серьезности
Какова интенсивность (шкала боли от 1 до 10, визуальные шкалы) симптома? Прямо сейчас? В худшем случае? Есть ли другие симптомы, сопровождающие боль?
T: Время и лечение
Когда впервые появились симптомы? Какие лекарства вы в настоящее время принимаете от этого? Насколько они эффективны? Побочные эффекты?
U: Понимание и влияние
Что, по вашему мнению, вызывает это? Как это влияет на ваши ADL, вас и / или вашу семью?
V: значения
Какова ваша цель для этого симптома? Какова ваша цель комфорта или приемлемый уровень для этого симптома? Есть ли у вас другие проблемы?
Скоро будет добавлено больше…
Знаете остроумную мнемонику медсестер? Если вы знаете еще несколько мнемоник по этой теме, поделитесь ими в нашем разделе комментариев ниже! Кроме того, здесь есть дополнительная мнемоника для медсестер.
Разверните смарт-контракт с Truffle | автор: Nhan Cao
- Установите Ganache
- Запустите Ganache и создайте новый проект, указав точку в файле truffle-config.js
- Зарегистрируйте новую учетную запись на infura.io
- Создайте новый проект
- Получите api проекта и ссылку для подключения:
`` ``
ROPSTEN_URL = https: //ropsten.infura.io/v3/
KOVAN_URL = https: //kovan.infura.io/v3/
RINKEBY_URL = https://rinkeby.infura.io/v3/
MAINNET_URL = https: // mainnet.infura.io/v3/
`` - Goto Truffle project, install node libs
``
npm install truffle-hdwallet-provider --save
npm install bip39 dotenv --save
# где
* bip39 - используется для генерации мнемоники кошелька
* dotenv - простой способ чтения файлов переменных окружения
``
- Сгенерировать MNEMONIC слова
`` `
node -e 'console.log (require (' bip39). generateMnemonic ()) "
` `
- Создайте файл` .env`, поместите MNEMONIC и _URL в файл
``
MNEMONIC = мнемоника кошелька 12 слов
ROPSTEN_URL = https: // ropsten.infura.io/v3/
KOVAN_URL = https: //kovan.infura.io/v3/
RINKEBY_URL = https: //rinkeby.infura.io/v3/
MAINNET_URL = https: //mainnet.infura.io/v3/
``
- Обновить файл truffle-config.js
``
require (' dotenv '). config ()
const HDWalletProvider = require (' truffle-hdwallet-provider ')
const MNEMONIC = process.env.MNEMONIC
const ROPSTEN_URL = process.env.ROPSTEN_URL
const KOVAN_URL = process.env.KOVAN_URL
const RINKEBY_URL = process.env.RINKEBY_URL
const MAINNET_URL = process.env.MAINNET_URL

module.exports = {
// Раскомментирование значений по умолчанию ниже
// упрощает быстрый запуск с Ganache.
// Вы также можете использовать этот формат для других сетей;
// см.
// для получения дополнительной информации о том, как указать параметры конфигурации!
contract_build_directory: "../frontend/src/Contract/abi",
сетей: {
development: {
host: "127.0.0.1 ",
порт: 7545,
network_id:" * "
},
test: {
host:" 127.0.0.1 ",
port: 7545,
network_id:" * "
},
ropsten: {
provider: () => новый HDWalletProvider (MNEMONIC, ROPSTEN_URL),
network_id: 3
},
kovan: {
provider: () => new HDWalletProvider (MNEMONIC, KOVAN_URL),
network_id: 42930 rinke : {
provider: () => new HDWalletProvider (MNEMONIC, RINKEBY_URL),
network_id: 4
},
// основная сеть ethereum (основная сеть)
mainnet: {
provider: () => new HDWalletProvider (MNEMONIC, MAINNET_URL) ),
network_id: 1
}
}

};
``
- для получения адреса общедоступного кошелька
``
truffle console --network
truffle (ropsten)> web3.eth.getAccounts ((err, accounts) => console.log (accounts))
например:
truffle console --network ropsten
truffle (ropsten)> web3.eth.getAccounts ((err, accounts) => console.log (учетные записи))
['0x627306090abab3a6e1400e9345bc60c78a8bef57']
``
- Подготовьте немного eth из тестового сетевого сборщика
`` `
https://faucet.metamask.io/
https://faucet.rops30.ua https://faucet.metamask.io/
http://faucet.bitfwd.xyz/
``

- Удалить старые файлы сборки api
- Запустить migrate
``
# Для локальной сети
трюфель migrate
# Fow specific network
truffle migrate --network
например:
truffle migrate --network ropsten
truffle migrate --network mainnet

# Migrate contract only
truffle migrate -f 2 --network ropsten
` ``

— — — —
Поддержка nhancv:
https: // paypal.me / nhancv
https://www.buymeacoffee.com/nhancv
https://www.patreon.com/nhancv
Мнемоны | Ахим Кауфманн | Achim Kaufmann / Trokaan
Это мой третий сольный фортепианный релиз, который, к сожалению, трудно достать здесь, в Европе. Благодаря любезности Рассела Саммерса и записей nuscope, я предлагаю это сейчас на bandcamp.
«… одна из лучших записей, которые я слышал за весь год».
Арт Ланге
«« Мнемон »Ахима Кауфмана — выдающаяся работа, которая не похожа ни на что другое.Насколько я понимаю, это начну с одного из самых больших комплиментов, которые можно сделать записи. (…) Я большой поклонник игры Ахима, и даже в его творчестве этот альбом кажется особенным ».
Александр Хокинс, пианист (Великобритания)
«Несомненный мастер игры на фортепьяно, он в то же время создатель весьма изобретательной музыки, а не хвастливый или претенциозный позер, поскольку настоящее — все еще или еще раз — может предложить немало. (… ) Величайший пианист Бибопа Бад Пауэлл посылает свое далекое, но ясно обнаруживаемое излучение в «Температуре расстояния».Между окном и свободой противопоставлены звуковые комплексы с контрастирующими характеристиками, что мало чем отличается от базовой концепции Gruppenkomposition Штокхаузена, впервые представленной в его комментарии к Klavierstücke I. »
Georg Graewe, Liner notes zu Mnemon
«В каждом сеттинге Кауфманн находит благоприятные возможности для своей дотошной техники, быстрой угловой атаки и острого гармоничного слуха. У него есть умение выстраивать свои линии из мотивных ядер, которые он фрагментирует и динамически перестраивает с подвижной конструктивистской чувствительностью.«
Майкл Розенштейн (Pointofdeparture.org)
«Здесь слишком много невероятных моментов, чтобы отдать должное этому диску. Это один из лучших сольных фортепианных дисков за последнее время».
Брюс Ли Галлантер, Музыкальная галерея в центре города (Нью-Йорк)
«Диапазон Кауфманна шире, чем у Эндрю Хилла, шире, чем у Сесила Тейлора, в начале и в конце карьеры. (…) Безусловно, это поэтическая игра, глубина которой окупается многократным прослушиванием ».
Энди Гамильтон, International Piano (Великобритания)
„Dass jeder Akkord und Anti-Akkord bei Kaufmann zählt, das bezeugt seine Soloaufnahme auf äußerst dringliche Weise.(…) Mnemon ist eine Visitenkarte des Solisten, und zugleich eine Einstiegsdroge, die den Einstieg in dessen Kosmos gewährt. (…) Jedes Stück gerät anders, wenngleichtimmungsmäßig in sich geschlossen; nichts scheint unmöglich, nur dass es langweilig wird, das bleibt ausgeschlossen ».
Габриэль Аниол, Jazz Podium (D)
выпущено 1 ноября 2018 г.
Ахим Кауфманн — фортепиано
вся музыка Ахима Кауфманна (GEMA)
зарегистрировано в Saal 3 / rbb Berlin
21-22 февраля 2018 г.
руководитель записи: Вольфганг Хофф
, инженер по записи и микшированию: Каспар Воллхейм
радиопродюсер: Ульф Дрехсель
мастеринг-инженер: Алан Бисе
исполнительный продюсер: Рассел Саммерс
работа gdr guenther
фотографии музыкантов: Кристина Маркс
пьес 3, 4, 5 и 6 вдохновлены стихами Габриэле Д.Р. Гюнтер
Запись посвящена памяти Кена Пикеринга и Вольфганга Хоффа.
выпущен как nuscope CD 1033
www.nuscope.org
Мнемоника, этимология и история | Ресурсы Wyzant
Определение мнемоники
Мнемоника , множественное число от мнемоника — это изучение техник путей чтобы легче запоминать информацию. Чаще всего мнемонический прием включает в себя: взяв первую букву из нескольких слов, которые вы хотите запомнить, а затем измените их в легко запоминающееся слово.Например, HOMES описывает имена Великие озера — Гурон, Онтарио, Мичиган, Эри и Верхний.
Этимология мнемоники
Мнемоника происходит от греческого мнемоникос , что означает «относящийся к памяти», что также происходит от мнемон , что означает «запоминание или внимательность» и от memne , что означает «память, запись или эпитафия». Это слово основано на mnasthai , «Помнить», что происходит от мужчин — , что означает «думать».”
История мнемоники
Мнемоника разделяет этимологию с Мнемозиной, греческим титаном, который представлял объем памяти. Мнемозина была дочерью Геи (Матери-Земли) и Урана. (бог неба). Мнемозина была матерью девяти муз (все они были отцами Зевса). Они спали вместе девять ночей, каждую ночь принося новую музу. Мнемозина также управляла водоемом в Аиде, соединенном с рекой Лета.Мертвец пить из реки Леты, чтобы не вспомнить прошлую жизнь однажды они перевоплотились; однако посвященных поощряли пить из Мнемозины бассейн, когда они умерли, вместо того, чтобы пить из Леты.
Использование мнемоники
Сегодня исследования показали, что использование мнемонических устройств в обучении значительно выгодно, потому что это позволяет памяти хранить «меньше» активной информации, тем самым позволяя человеку одновременно запоминать (или помнить) больше.Это расширение кратковременной памяти способствует созданию долговременных воспоминаний. Различные виды мнемонических приемов включают аббревиатуры, аллитерацию, анаграммы, группы, числа, стихи, рифмы и отрывки. Вот некоторые распространенные мнемонические приемы:
ROY G BIV : для запоминания цветов радуги (красный, оранжевый, желтый, зеленый, синий, индиго, фиолетовый).
Моя очень энергичная мама только что подала нам лапшу : запомнить порядок планеты (Меркурий, Венера, Земля, Марс, Юпитер, Сатурн, Уран, Нептун).
PEMDAS or Please Excuse My Dear Aunt Sally : запомнить порядок действий используется в математике (круглые скобки, экспоненты, умножение и деление, сложение и Вычитание).
Короли играют в шахматы на прекрасной траве : запомнить порядок таксономии в биологии (Царство, Тип, Класс, Отряд, Семья, Род, Вид).
Каждый хороший мальчик заслуживает помадки : запомнить порядок заметок на каждой линия музыкального посоха, начиная с нижней линии и двигаясь к вершине (E, G, B, D, F).
Главный SOHCAHTOA : помнить, как вычислять синус, косинус и тангенс математические функции (sin = противоположный / гипотенуза, cah = смежный / гипотенуза, toa = противоположный / смежный).
Чтобы запомнить, сколько дней в месяце:
Сентябрь тридцать дней,
Апрель, июнь и ноябрь;
У всех остальных 31,
За исключением одного февраля,
Который имеет только 28, в порядке,
До високосного года 29.
.

Мнемон. Альманах, №13. Исследования и публикации по истории античного мира | ISBN 9785752507380

Святослав Логинов «Свет в окошке»

Каллистов Дмитрий Павлович | СПбИИРАН

Каллистов Дмитрий Павлович

7. Учебно-методическое и информационное обеспечение дисциплины «История государства и права зарубежных стран»

Журнал ‘Актуальные проблемы российского права’

Журнал ЧЕРНЫЕ МЕТАЛЛЫ

Мифология, теология и историософия царской власти в Египте | Александрова

Мнемон Медицинское определение | Медицинский словарь Merriam-Webster

Медицинское определение

мнемоник — Викисловарь

Английский [править]

Альтернативные формы [править]

Этимология [править]

Произношение [править]

Прилагательное [править]

Переводы [править]

Существительное [править]

Синонимы [править]

Производные термины [править]

Переводы [править]

Связанные термины [править]

См. Также [править]

Ссылки [править]

Механизм предотвращения трансформации мнемона Whi3 в прион

Abstract

Введение

Результаты

Клетки, лишенные диффузионных барьеров, могут приобрести новое рефрактерное состояние к феромонам

Компартментализация эндоплазматического ретикулума не требуется для индукции и лечения прионов.

Суперсборки Whi3 и фокусы Sup35 различаются по их ассоциации с мембранами ER

Компартментализация эндоплазматического ретикулума необходима для сохранения Whi3

Прионоподобный домен Whi3 необходим для симметричного наследования рефрактерного состояния в клетках с нарушенным диффузионным барьером

Обсуждение

Материал и методы

Штаммы

Микроскопия

Microfluidics

Количественная оценка Shmooing

Количественное определение суперкомплексов Whi3-3GFP

Количественная оценка [PSI +]

Количественная оценка отверждения [PSI +] во время обработки GuHCl

Количественная оценка считывания стоп-кодона с помощью проточной цитометрии

Количественная оценка частот CE

Измерения размеров клеток

Количественная оценка фокусов Sup35 и совместной локализации суперсборок / фокусов / гранул Whi3 с мембранами ER

Благодарности

Мнемоника и советы по оценке состояния здоровья медсестер

Разверните смарт-контракт с Truffle | автор: Nhan Cao

Мнемоны | Ахим Кауфманн | Achim Kaufmann / Trokaan

Мнемоника, этимология и история | Ресурсы Wyzant

Определение мнемоники

Этимология мнемоники

История мнемоники

Использование мнемоники

You may also like...

Формирование первого впечатления: Формирование первого впечатления — Реферат – Особенности формирования первого впечатления (стр. 1 из 2)

Кровь иисуса цветок: Существует ли на самом деле цветок «Кровь Иисуса на кресте» – Цветы Иисуса Христа

Добавить комментарий Отменить ответ